2015如何规范病原体检测及结果的正确解读-王锦权.pptVIP

如何规范病原体检测及结果的正确解读 一. 病原体检测的目的 抗感染治疗 经验治疗(empirical therapy ) 推测可能的病原体及敏感性选用药物； 建立在流行病学资料之上（重要参考耐药监测资料）； 建立在概率权衡上，为保证有效概率常常以选用广谱、强效抗菌药为代价； 治疗初始的必然选择，亦用于非重症感染。 病原治疗(目标治疗，target therapy) 根据病原学诊断、药敏选择药物，是理想之选； 医院感染、重症社区感染应确保达到病原治疗； 临床微生物室起关键作用； 培养结果的准确解读。 临床病原体检查目的 1.感染性疾病的明确诊断； 2.通过药敏试验指导临床合理用药； 3.病原体监控和耐药性监控。 各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则 1.正确、规范采集和运送标本。 2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原，借助分子生物学的方法检测病原体核酸，结合病人的病史、症状或体征，快速作出初步诊断。 各种不同病原体的实验诊断方法遵循以下基本原则 3.初步诊断同时，对病原体进行分离与鉴定。 4.检测机体对病原体的免疫产物。 5.参与临床选择抗菌药物，指导和监控微生物的治疗方案，避免 耐药菌株的产生。 二. 临床标本的正确采集 临床病原体检查的基本程序 医生、护士、病人、检验师：正确采集运送标本。 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验——报告结果。 医生：明确诊断、合理用药。 有资料显示，微生物室的误差71%是实验前因素造成的。 标本采集的基本原则 无菌、及时、按照要求、标注清晰 根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位，尽量采集病变明显部位标本。 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗菌药物使用前（如使用过抗菌药物应在申请单上注明）。 采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、立即送检。 标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。 标本送检 标本要求在30min内送检，否则影响阳性率。 烈性传染病标本需专人护送。 拒收标本 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不符合。 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过长。 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 5.样本的检验项目申请不适合进行。 6.当日重复送样本（除血液培养外）。 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 8.被正常厌养菌污染的标本，要求检测。 三. 病原体检测方法 临床常见病原体检查方法 直接显微镜检 血清学诊断(查特异性抗原/抗体) 病原体核酸检测(PCR.DNA探针) 病原体的分离培养和鉴定 临床感染常见病原体检查 细菌形态学检查 直接观察法 染色标本镜检 临床感染常见病原体检查 真菌感染(fungi infection) 1.直接检查：孢子与菌丝 2.分离培养 3.血清学检测 4.分子生物学检查 G试验 (1-3)-β-D-葡聚糖是真菌的重要组成成份, 广泛存在于除接合菌之外的真菌细胞壁中,占真菌细胞壁成分的50%以上。深部真菌感染时,(1-3)-β-D-葡聚糖可从胞壁中释放出来,进入血液及其他体液中,即可以检测到其中的(1-3)-β-D-葡聚糖水平异常升高。而浅表真菌感染或真菌定植时血清(1-3)-β-D-葡聚糖则常不会升高。通过对血清中(1-3) -β-D-葡聚糖的检测,发现其对系统性真菌感染的诊断有重要价值,为早期快速确诊深部真菌感染提供有力证据。 含量大于50pg/ml判为阳性 GM试验 GM试验检测的是半乳甘露聚糖，曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖残基，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原。GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。连续检测GM可作为治疗疗效的监测。 以下情况可出现假阳性：⑴已使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；⑵新生儿和儿童；⑶血液透析；⑷自身免疫性肝炎等；⑸食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。 以下情况可出现假阴性：⑴释放入血循环中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持续存在而是会很快清除；⑵以前使用了抗真菌药物；⑶病情不严重；⑷非粒细胞缺乏的患者。 阳性：≥0.5 临床感染常见病原体检查 其他病原体感染： 1.支原体检测：分离培养和分子生物学技术 2.螺旋体检测：暗视野显微镜检、血清学检测 3.立克次体检测 4.衣原体检测：分离培养 5.原虫检测 四. 检测结果的正确解读 痰培养阳性结果分析 常见有三种情况 第一种情况：患者有典型的呼吸道感染症状，按细菌药敏报告选抗菌药物疗效明显 这类患者的痰标本共同特征：痰涂片革兰染色:见大量的白细胞，并见白细胞吞噬或伴行大量形态一致的非上呼吸道正常菌；痰培养：生长大量非上呼吸道正常菌，痰培养与痰涂片所见一致 结论：