分解纤维素的微生物的分离2008.10展示苏.pptVIP

教材分析 第一部分： 关于纤维素的相关基础知识以及研究分解纤维素的微生物的对于社会的意义，体现STS的新课程理念。 第二部分： 关于分离相应菌的实验操作 第二部分：关于分离相应菌的实验操作 第一部分 关于纤维素的相关基础知识以及研究分解纤维素的微生物的对于社会的意义。 思考：纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过70亿吨，但却不会在地球上大量的积累，为什么？ 实施反思 了解纤维素及分解纤维素的微生物 体会筛选微生物的科学思想 鉴定是否筛选成功（结合实际情况） 教师的知识储备，时间安排要合理 理论联系实际，大胆筛选、改进教材 着眼于生活，着眼于实际，培养学生能力！！ * * “分解纤维素的微生物的分离” --实施策略 天津二中 苏震云 ①分布环境 （1）土壤取样： 富含纤维素的环境中 2、操作步骤 由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 ②原因 ③实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。 ④讨论:如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？ 答：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。 （2）选择培养 ①目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需要的微生物 ②操作：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 mL培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床上，在30 ℃下振荡培养1～2 d，至培养基变混浊。吸取一定的培养液（约5 mL），转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变浑浊。 （3）梯度稀释： （4）涂布培养 1、刚果红染色法: （5）筛选菌株： 常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行染色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红 ①方法 ②试验结果 实验组： 经刚果红染色法，菌落周围将会出现明显的透明圈 对照组： 不含纤维素的培养基经刚果红染色法，菌落周围不出现明显透明圈 ③讨论：这两种方法各有哪些优点与不足？ 答：方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。 方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂的问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应，但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。 在产生明显的透明圈的菌落，挑取并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在300C－ 370C培养，可获得纯培养。 方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间的培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。 2、挑菌 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，是天然有机高分子化合物：自然界中纤维素含量最高的天然产物是棉花，含量达92％～95％，亚麻达80％，此外木材、作物秸秆也富含纤维素。