微生物学检验基本技术!!.doc

1．葡萄糖代谢类型鉴别试验（O/F或Hugh－Leifson，HL） 下层：蛋白胨????1克????????????氯化钠????0．5克???????? 葡萄糖????0.2克????????? 水???????100毫升Bromo cresol purple)乙醇溶液0.1-0.2mL PH=7.6 注意: 调完pH值后再加葡萄糖. (1)原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。本试验又称氧化发酵（O/F或Hugh－Leifson，HL）试验，可用于区别细菌的代谢类型。 (2)方法：挑取少许纯培养物（不要从选择性平板中挑取）接种2支HL培养管中，在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气（作为密封管），另一管不加（作为开放管）。置3℃孵箱孵育48h以上。 (3)结果：两管培养基均不产酸（颜色不变）为产碱型；两管都产酸（变黄）为发酵型；加液体石蜡管不产酸，不加液体石蜡管产酸为氧化型。 (4)应用：主要用于肠杆菌科与其它非发酵菌的鉴别。肠杆菌科、弧菌科细菌为发酵型，非发酵菌为氧化型或产碱型。也可用于鉴别葡萄球菌（发酵型）与微球菌（氧化型）。 2.氧化酶试验 (1)原理：氧化酶又称细胞色