第一章组织培养基本原理和设施.解读.pptVIP

一、植物组织培养的基本原理 1.植物细胞全能性 植物细胞的全能性：植物细胞的全能性是指植物体的每个具有完整细胞核的细胞，都具有该植物的全部遗传信息和发育成完整植株的潜在能力。 原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 两个含义： 1）植物细胞无论是体细胞还是生殖细胞，均具有该物种全部的遗传信息. 2）每个植物细胞均具有发育成完整植物体的潜在能力. 差异：（1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 潜在全能性的原因：基因表达的选择性 科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。 2、植物细胞的分化 植物细胞分化是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。 植物细胞分化是多细胞生物体形态发生的基础。 植物个体的发育是植物细胞不断分裂、生长和分化的结果。在整个植物生长发育过程中，由于顶端分生组织活跃分裂的结果，通过一系列复杂的形态发生过程，形成不同的器官和组织，即在植物体内分化出了各种不同类型的细胞群。从而使植物体的成熟部分具有了复杂的内部结构，最后开花结实完成其生活史。 细胞分化在植物形态建成中是一个核心问题，没有细胞的分化就没有形态建成。 细胞分裂、生长、分化是生物体发生的三个基本现象。 细胞分化的结果：导致形态发生，从而形成不同器官，不同器官又执行着不同功能。 植物的每个生活细胞具有全能性，但任何一个细胞在其整个生活周期中，只能表达其基因库中的极小部分内容，而各个细胞在不同的时间、空间和内外条件下，表达的内容是不同的，因而就出现了机能和形态的差异。所以，分化也可说是一个基因型的细胞所具有的不同的表现型。 细胞的结构和功能的不同或发育方式的不同，从而产生分工的不同。 在系统发育上，植物越进化，细胞分工越细致，细胞的分化就越剧烈，植物体的内部结构也就越复杂。 细胞分化是一个复杂的问题，同一植物的所有细胞均来自于受精卵，它们具有相同的遗传物质，但它们却可以分化成不同的形态；即使同一个细胞，在不同的内外条件下也可能分化成不同的类型。细胞的极性、细胞在植物体中的位置、细胞的发育时期、各种激素和某些化学物质，以及光照、温度、湿度等物理因素都能影响分化。 所以我们可以通过人为的控制，使得分化的结果能够满足人们的需要。 在分化的控制上，激素的调节作用是十分重要的。但调控因子是十分复杂的，另外像外界环境因子(光、温度等)及细胞和组织内本身的启动和操纵，都能影响到细胞分化。 3.植物激素在形态建成中的作用 植物激素是指自然状态下植物体内合成，并从产生处运送到别处，对生长发育产生显著作用的微量有机物。 植物激素是培养基的关键物质，对植物组织培养起着十分重要和明显的调控作用，植物激素包括内源激素生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸、乙烯及人工合成的植物生长调节剂。 IAA(吲哚乙酸) 是天然存在的生长素，亦可人工合成，其活力较低，是生长素中活力最弱的激素，对器官形成的 副作用小，高温高压易被破坏，也易被细胞中的IAA分解酶降解，受光也易分解。 NAA(萘乙酸) 在组织培养中的起动能力要比IAA高出3-4倍，且由于可大批量人工合成，耐高温高压，不易被分解破坏，所以应用较普遍。NAA和IBA广泛用于生根，并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。 IBA(吲哚丁酸) 是促进发根能力较强的生长调节物质。 2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸) 起动能力比IAA高10倍，特别在促进愈伤组织的形成上活力最高，但它强烈抑制芽的形成，影响器官的发育。适宜的用量范围较狭窄，过量常有毒效应。 生长素配制可先用少量95％酒精助溶。 2，4-D可用0.1mol／L的NaOH或KOH助溶。生长素常配成1mg/ml的溶液贮于冰箱中备用。 注意：天然的生长素热稳定性差，高温高压或受光条件易被破坏。在植物体内也易受到体内酶的分解。组织培养中常用人工合成的生长素类物质。 2 细胞分裂素类 这类激素是腺嘌呤的衍生物，细胞分裂素有激动素(KT)、6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、