生化实验教案.docVIP

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  • 2016-04-11 发布于重庆
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生化实验教案

实验七、氨基酸的纸 徐 州 工 程 学 院 教 案 纸 六、实验结果 氨基酸纸层析图谱并分析结果。 七、思考题 如何采用氨基酸纸层析法分离多种氨基酸? 动物肝脏中DNA的提取 一、目的学习和掌握用浓盐法从动物组织中提取DNA的原理和技术 二、原理核酸和蛋白质在生物体中以核蛋白的形式存在,其中DNA主要存在于细胞核中,RNA主要存在于核仁及胞质中,在制备核酸时应防止过酸、过碱及其它能引起核酸降解的因素的作用。全部操作过程应在低温下(4℃)进行,必要时还要加入酶抑制剂。如柠檬酸、氰化物、砷酸盐、乙二胺四乙酸(EDTA)等可以抑制DNA酶活性,皂土可抑制RNA酶活性,同时SDS或苯酚等蛋白变性剂也可使核酸降解酶破坏。   动植物的DNA核蛋白能溶于水及高浓度的盐溶液(如1mol/L NaCl),但在0.14mol/L 的盐溶液中溶解度降低,而RNA核蛋白则溶于0.14mol/L 盐溶液,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将脱氧核糖蛋白和核糖蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得到的脱氧核糖蛋白用SDS(十二烷基硫酸钠)处理,DNA即与蛋白质分开,可用氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去,而DNA则溶解于溶液中。向含有DNA的水相中加入冷乙醇,DNA即呈纤维状沉淀出来。三、实验器材 1.?猪肝。 2.?722型(或7220型)分光光度计。 3.?匀浆器 4.?量筒50ml(

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