生物高考大纲20个实验.docVIP

生物高考大纲要求的20个实验 实验一：观察DNA和RNA在细胞中的分布 一、实验原理： 1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。 2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。 了解内容： 甲基绿—吡罗红（methyl green-pyronin）为碱性染料，它分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。当甲基绿与吡罗红作为混合染料时，甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色；吡罗红与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用，同时两种核酸分子都是多聚体，而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而吡罗红则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色（但解聚的DNA也能和吡罗红结合呈现红色）。即RNA对吡罗红亲和力大，被染成红色，而DNA对甲基绿亲和力大，被染成绿色。 3、盐酸的作用 ① 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输； ② 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合 二、实验材料：人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 三、实验用具：大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜 四、方法步骤： 1、取材 ① 滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液; 原因：0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂，维持细胞的形态 ② 刮：用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下； ③ 涂：将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中； ④ 烘：将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 原因：烘干使细胞固定在载玻片上 2、水解 ① 解：将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解； 原因：盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。 ② 保：将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。 3、冲洗涂片 ① 冲：用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟； ② 吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。 4、染色 ① 染：用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟； ② 吸：吸去多余染色剂； ③ 盖：盖上盖玻片。 5、观察 ① 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； ② 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。 五、考点提示： 1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞； 3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗； 4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂； 5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。 实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 二、实验原理： 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如： 葡萄糖 + 2Cu2+ + 4OH— 加热 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色沉淀 淀粉遇碘变蓝色。 2、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ等。脂肪被染色，实际上