基因工程实验小麦GAPDH截短体的重组与表达报吿.docVIP

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2016-04-11 发布于湖北
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基因工程实验小麦GAPDH截短体的重组与表达报吿.doc

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PAGE 2011015 学号：2011015基因工程实验报告题目：小麦GAPDH截短体的重组与表达学院(系)：创新实验学院专业年级：生技112班学生姓名：指导教师：潘君风完成日期：2014年1月目录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc377861728 题目：小麦GAPDH截短体的重组与表达 PAGEREF _Toc377861728 \h 1 HYPERLINK \l _Toc377861733 1.1材料 PAGEREF _Toc377861733 \h - 3 - HYPERLINK \l _Toc377861734 1.2试剂 PAGEREF _Toc377861734 \h - 3 - HYPERLINK \l _Toc377861735 1.3仪器 PAGEREF _Toc377861735 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc377861736 2.1步骤 PAGEREF _Toc377861736 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc377861737 2.1.1小麦总RNA提取（Trizol法） PAGEREF _Toc377861737 \h - 5 - HYPERLINK \l _Toc377861738 2.1.2 RT-PCR 扩增目的基因 cDNA PAGEREF _Toc377861738 \h - 6 - HYPERLINK \l _Toc377861739 2.1.3核酸琼脂糖电泳分析 PAGEREF _Toc377861739 \h - 6 - HYPERLINK \l _Toc377861740 2.1.4质粒提取 PAGEREF _Toc377861740 \h - 7 - HYPERLINK \l _Toc377861741 2.1.5质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 PAGEREF _Toc377861741 \h - 7 - HYPERLINK \l _Toc377861742 2.1.6载体和外源DNA的连接反应 PAGEREF _Toc377861742 \h - 8 - HYPERLINK \l _Toc377861743 2.1.7感受态细胞的制备与转化 PAGEREF _Toc377861743 \h - 8 - HYPERLINK \l _Toc377861744 2.1.8克隆的筛选和快速鉴定 PAGEREF _Toc377861744 \h - 9 - HYPERLINK \l _Toc377861745 2.1.9表达载体和目的片段的酶切 PAGEREF _Toc377861745 \h - 9 - HYPERLINK \l _Toc377861746 2.1.10目的基因诱导表达 PAGEREF _Toc377861746 \h - 10 - HYPERLINK \l _Toc377861747 2.1.11 Western Blotting PAGEREF _Toc377861747 \h - 10 - HYPERLINK \l _Toc377861748 2.2结果 PAGEREF _Toc377861748 \h - 12 - HYPERLINK \l _Toc377861749 2.3讨论 PAGEREF _Toc377861749 \h - 13 - HYPERLINK \l _Toc377861750 2.4总结 PAGEREF _Toc377861750 \h - 14 - HYPERLINK \l _Toc377861751 参考文献 PAGEREF _Toc377861751 \h - 14 - HYPERLINK \l _Toc377861752 附录 PAGEREF _Toc377861752 \h - 15 - HYPERLINK \l _Toc377861753 1、小麦3-磷酸甘油醛脱氢酶截短体信息 PAGEREF _Toc377861753 \h - 15 - HYPERLINK \l _Toc377861754 2、载体构建信息 PAGEREF _Toc377861754 \h - 15 - HYPERLINK \l _Toc377861755 3、表达载体 pGEX 4T-1 图谱 PAGEREF _Toc377861755 \h - 17 -小麦GAPDH截短体的重组与表达 1 -小麦GAPDH截短体的重组与表达创新实验学院生技112班摘要：GAPDH基因为管家（house keeping）基因，几乎在所有组织中都