第五章色谱分析法2.docVIP

§4 高效液相色谱法 一、概述 1、定义 在经典液相色谱法基础上，吸收了气相色谱法的理论，并采用高压输液泵、高效固定相和高灵敏度检测器等装置的色谱技术称为高效液相色谱法，又称为高压液相色谱法。 2、特点 ①高压 由于液体的粘度比气体大得多，所以，当液体流动相通过色谱柱时会受到很大的阻力，需采用高压泵对载液施加压力，压力可达100～350×105Pa。 ②高速 流动相在柱中的流速大，分离速度快，一次分析只需几分钟至几十分钟就能完成。分析时间比经典液相色谱法短得多，与气相色谱法近似。 ③高效 使用了新型固定相，柱效远高于气相色谱法。另外，流动相可进行选择，有单溶剂、多元溶剂，并可任意调配比例，可改变流动相的组成、极性、pH值等性质，因此改善了分离效果。而气相色谱法的流动相种类少，性质相近，且与组分之间不发生特殊作用，故改变载气种类不能很大地改善分离效果。该法分离温度远低于气相色谱法，更有利于分离。 ④高灵敏度 采用高灵敏度的检测器，提高了分析灵敏度，如紫外检测器的灵敏度可达5×10－10g·mL－1。 ⑤应用范围广 一般对能制成溶液的试样均能分析，尤其适用于分析高沸点、大分子、热稳定性差、强极性化合物和各种离子型化合物，如分离分析氨基酸、蛋白质、维生素、生物碱、糖类、农药等。而气相色谱法无法分析高沸点（300℃以上）或不能汽化的物质。 ⑥液相色谱易实现分离后样品中各组分