实验诊断第2部分 基本血浆化学与血浆酶学指标的实验诊断应用基础.doc

【第部分基本血浆化学实验诊断第章 蛋白质是人体含量和种类最多的物质，蛋白质人体干重的45%，约10万余种。几乎在所有的生命过程中蛋白质起着关键作用如酶、多肽激素、、转运蛋白、收缩蛋白细胞骨架蛋白等均属于蛋白质。疾病状况下一般均有蛋白质代谢，体内蛋白质的结构、种类、含量、分布和功能均可能发生变化。疾病状况的蛋白质代谢变化可以通过血浆蛋白质的变化在一定程度上得到反映，因而血浆蛋白质分析了解、等。 第一节 血浆蛋白质的基本知识简介一、血浆蛋白质的基本概念与基本功能存在于血浆中的蛋白质统称为血浆蛋白质(plasma protein)是血浆中含量和最多的成分，其种类约有一千种以上，目前已有所了解的血浆蛋白约有种之多，其中已被分离的约有种，用于实验诊断的有数十种。90%以上的源于肝脏，其余由免疫系统与其它肝外组织产生。最终被肝外组织及肝脏所摄取而分解利用。生理状况下，的与保持动态平衡，维血浆蛋白质在体内转换情况(70 kg体重成人)持总量及组分相对恒定。的基本功能①维持血浆胶体渗透压、②参与维持血浆pH值、③营养作用、④运输作用、⑤凝血和抗凝血作用、⑥免疫作用与防御作用等。功能中，营养作用、运输载体作用、维持胶体渗透压和是多的有功能，如血浆蛋白兼具有这些功能其他为的特殊功能，如蛋白酶抑制剂作用、凝血和纤维蛋白溶解、免疫和防御功能等。二血浆蛋白质的分类简介 分类是个，随着方法的进展和对功能了解的增多，可从不同角度进行归纳分类。最简单的是将分为清蛋白和球蛋白两大类，应用电泳获得电泳分类的图谱，功能分类比较复杂但有利于对进行研究。 1经典分类使用27%硫酸钠或28%亚硫酸钠为沉淀剂沉淀剂%硫酸钠，离心分离后可将分为上清可溶部分的清蛋白和沉淀析出部分的球蛋白两大类。。 2功能分类按功能进行分类，如运输载体、补体系统蛋白凝血因子等等，但因很多蛋白质的功能尚不清楚而且许多蛋白质具有多种功能，故此分类法还存在许多问题。 3电泳分类利用醋酸纤维素薄膜电泳和琼脂糖凝胶电泳将分为(A)和α1、α2、β、γ球蛋白5个主要区带，分辨率高时，β区带还可分出β1和β2区带，甚至可在α2区带中再分出2个区带如果采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，可以分出0多个区带。 4分类基本指标蛋白质(总蛋白、、及电泳组分)、急性时相反应蛋白质(CRP、PA等)、营养指标蛋白质(PA、A、视黄醇结合蛋白等)、免疫蛋白质、肿瘤指标蛋白质(AFP、CEA等)、其他。 三检测血浆蛋白质的基本意义与基本方法1、基本意义 机体通过调节蛋白质产生与分解的平衡，维持血浆中蛋白质的种类与含量的动态恒定。营养不良主要导致血浆蛋白质含量降低，疾病可导致血浆蛋白质种类与含量发生变化。监测血浆蛋白质主要用于监测、评估营养状况等。 、方法 应用双缩脲法、染料结合法、免疫分析法等测定血浆蛋白质，应用琼脂糖凝胶电泳进行血浆蛋白质组分分析。根据需要、要求或约定，可用血浆标本或血清标本，的主要差别在于是否有纤维蛋白原。血浆蛋白质的结构、功能、代谢以及在病理情况下变化的资料已经越来越多地被获得随着技术的发展，许多微量血浆的分析已变得容易因而血浆蛋白质在监测等方面的应用日益广泛。基本血浆蛋白质的 基本血浆蛋白质包括总蛋白(TP)、白蛋白(albuminAlb or ALB)和球蛋白(globulinGlo)，检测手段包括蛋白质定量分析和蛋白质组分分析。基本血浆蛋白质主要血浆的总体情况和蛋白质代谢的一般动态，提供体内蛋白质平衡的一般情况某些特殊意义。注：现在白蛋白与清蛋白两个名词是混用的严格来讲，白蛋白是指肝细胞合成的一种单一的蛋白质，名称来自albumin；清蛋白是指沉淀分离法上清液中的蛋白质，白蛋白是清蛋白的成分之一，也是主要成分。 血清和血浆都可用于TP、A和Glo测定。空腹采集静脉血，按常规方法血清(浆)密封储存在无蒸发条件下，血清或血浆贮于2～8冰箱，5内稳定；?20冻结贮存，可稳定更长时间。注：因蛋白在冰冻过程中下沉导致样品上下层蛋白浓度不均匀，在测定前，取出融化后需轻轻颠倒混匀。血浆因含纤维蛋白原(F)的原故，肝素抗凝血浆的TP值一般比血清高约3g/L，在进行蛋白质组分分析时血浆多出一个F区带。测定Alb推荐选用血清标本。采用肝素抗凝血浆可能使溴甲酚绿(BCG)染料结合法测得的Alb值偏高，肝素还可能干扰溴甲酚紫(BCP)染料结合法。肝素干扰Alb测定的原因可能是由于在肝素存在下使550～700nm范围内吸光度增加所致采用600/700nm双波长比色或在试剂中加入海美溴铵(hexadimethrine bromide)可以消除这种干扰。明显的脂血可干扰测定Alb，因此推荐早晨空腹取血制备标本。含脂类较多的乳糜标本影响检测准确性，需进行预处理以消除测定干扰。溶血标本中，每存在1g/L的血红蛋白可引起TP测定值