专题四酵母细胞的固定化分析报告.ppt

刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法： 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。 这一阶段成功与否呢？怎样评价？ 观察凝胶珠的颜色和形状: 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。 （二）用固定化细胞发酵 1、将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2-3次。 2、 将150mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200mL的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25℃下发酵24h。 这一阶段成功与否呢？怎样评价？ 观察发酵的葡萄糖溶液； 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。 还有其他方法吗？ * 温故知新： 1、洗衣粉中添加________，可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。 2、影响酶活性的因素有_______、 ________和_________。 酶制剂的优点： 催化效率高、低耗能、低污染，大规模地应用于食品、化工等各个领域。 酶制剂存在的缺陷： 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本； 3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。 如果你是工程技术人员，你如何解决这个问题？ 固定化酶技术 阅读P49-50，并思考： 1、解决酶应用中存在问题的方法是？ 2、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 3、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这种酶有何特点？ 4、了解高果糖浆生产过程。 5、这种方法的优点是什么？ 一、固定化酶的应用实例 1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。 1、解决酶应用中存在问题的方法是？ 2、高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人的健康有利。 你能写出果糖的分子式吗? 它属于什么糖? 2、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 3、生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶；其作用是将葡萄糖转化为果糖；这种酶稳定性好，可持续发挥作用。 3、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这种酶有何特点？ 4、固定化酶技术生产高果糖浆的过程： 注意反应柱的各部分名称。 你能说出反应柱的优点吗？ 5、固定化酶技术的优点： （1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离； （2）固定在载体上的酶可以被反复利用。 5、这种方法的优点是什么？ 在生产实际中使用固定化酶技术的不足： 一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行，所以操作比较麻烦。 怎么办? 可采用固定化细胞技术。 二、固定化细胞技术 1、概念： 利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。 细胞中含有一系列酶，在细胞正常生命活动的过程中，通过代谢产生所需要的代谢产物。 阅读P50：思考第二段的问题 2.将酶或细胞固定化的方法 将酶（或细胞）包埋在细微网格里 将酶（或细胞）相互连接起来 将酶（或细胞）吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 物理吸附法 酶和细胞固定方法的选择 ①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定 ②细胞适合采用包埋法固定 （1）、方法 （2）、原因 ①细胞个大，酶分子很小 ②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出 3、固定化细胞常用的载体 常用的不溶于水的多孔性载体有哪些？ 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 如果反应底物是大分子物质，能否用固定化细胞技术? 为什么？ 那应该采用何种技术? 三、实验操作 （一）制备固定化酵母细胞 阅读P50~51思考下列问题： （1）制备过程包括哪几个步骤？ （2）你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？ 1、酵母细胞的活化 思考： 关于酵母菌你有哪些知识？ 什么是活化？ 怎样活化？ 应注意什么？ 活化： 让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态； 本质： 加快新陈代谢； 方法： 加入适量的水。 取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右使其活化 思