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二轮专题复习“PCR技术”
二轮专题复习“PCR技术”
一、知识回顾
聚合酶链反应法(PCR法):PCR技术可模拟细胞核内DNA复制的天然过程,可在3~4h内使目的基因扩增上百万倍,达到肉眼可见的量,不需要放射性同位素标记就能分析、检测基因,大大提高了基因检测的灵敏度。具体过程:首先,把DNA加热,使双链分开;然后将人工合成的一段单链核苷酸即DNA引物,黏附到DNA单股螺旋上;之后按照引物就能够复制出DNA来,重复放大50次后就可以制成10亿个基因。在PCR放大过程中的关键是利用耐热DNA聚合酶使少量的DNA在短期内即能扩增数百万倍,便于分析、检测。
二、试题精练
1、PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下,加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是
A.dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作DNA合成的原料
B.dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖
C.DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA解旋
D.CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一
2、多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:( )
A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
3、下列有关PCR技术的叙述,不正确的是:( )
A.PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段
B.PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等
C.PCR技术需在体内进行 D.PCR技术是利用碱基互补配对的原则
4、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体
A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥
5、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)放入PCR仪中扩增4代,那么,在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是
A.640 B.8100 C.600 D.8640
6、对禽流感的确诊,先用PCR技术将标本基因大量扩增,然后利用基因探针,测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置,M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置, 哪份标本最有可能确诊为禽流感 ( )
A.M B.N C.Q D.W
7、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性,于是做了如下检测工作,其中正确的操作步骤及顺序是
①降低温度,检测处理后形成的杂合DNA双链区段
②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA
③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中
④在一定的温度条件下,将巨型动物和大象的DNA水浴共热
A.②④③ B.②④③① C.③④① D.②④①
8.(8分)聚合酶链式反应(PCR技术)是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术,反应系统中包括微量样品DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4种脱氧核苷酸及ATP等。反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板,故DNA数以指数方式扩增,其简要过程如右图所示。
(1)某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸,已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4,则经过PCR仪五次循环后,将产生 个DNA分子,其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是 个。
(2)分别以不同生物的DNA样品为模板合成的各个新DNA之间存在差异,这些差异是
。
(3)请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处:
① 。
②
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