现代技术紫外可见吸收光谱法教案分析.ppt

1. 根据化合物的紫外－可见吸收光谱推测化合物所含的官能团 ① 紫外－可见光区无吸收峰 ② 200～250 nm有强吸收峰 ③ 260～350 nm 有强吸收峰 可能不含双键或环状共轭体系，可能是饱和有机物 可能含有两个双键的共轭体系 至少有3～5 个共轭发色团和助色团 ⑤ 260 nm 附近有中吸收且有一定的精细结构 ④ 270～350 nm 有很弱的吸收峰，且无其他强吸收峰 可能含有芳香族结构 化合物含带 n 电子的未共轭发色团，弱峰由　　　　跃迁引起 2.　利用紫外－可见吸收光谱判别有机化合物的同分异构体 （1）乙酰乙酸乙酯的互变异构体 无共轭双键，206 nm 有中吸收 有共轭双键， 245 nm 有强吸收，κ=1.8×104 L·mol-1·cm-1 （2）1, 2-二苯乙烯顺式和反式两种异构体 无立体障碍，偶极矩大，易产生共轭 位阻效应 有立体障碍，偶极矩小 3.　配合物组成的测定 摩尔比法 　适用于解离度较小的配合物。 固定一种组分如金属离子 M 浓度，改变配位剂 R 的浓度，作A~ cR/cM 图。利用外推法得交叉点D。 D点所对应的浓度比值即为配合物的配位比。 三、定量分析 1. 单组分物质的定量分析 （2）标准曲线法 （1）比较法 2. 多组分物质的定量分析 （1）吸收光谱不重叠 （2）吸收光谱单向重叠 （3）吸收光谱双向重叠 （4）双波长分光光度计法 比较法 标准溶液与样品溶液浓度相近 适合少量样品的测定 标准曲线法 利用 A-c 标准曲线。 适合大量样品的测定。 吸收光谱不重叠 组分的吸收峰相互不干扰，按单组分的测定方法测定。 吸收光谱单向重叠 吸收光谱双向重叠 双波长分光光度计法 组分 b 在λ1 处的吸光度等于它在λ2 处的吸光度。 参比波长 此法还可用于测定浑浊样品，吸光度相差很小且干扰又多的样品，及颜色较深样品。 四、示差分光光度法（量程扩展技术） 以与试液浓度接近的标准溶液作参比 　ΔA=Ax – As =κ( cx – cs )L =κΔcL 以ΔA与Δc 作校准曲线，根据测得的 ΔAx 查得相应的Δc cx =cs + Δc 原 理 1. 单标准示差分光光度法 （1）高浓度试液法 （2）低浓度试液法 2. 双标准示差分光光度法 高浓度试液法 在检测器未受光照时调T=0，用浓度比试液浓度 cx 稍低的参比溶液 cs 调T=100%，然后测定待测物质的透射率或吸光度。 一般应控制待测液的吸光度在0.2～0.7（透射率为65％～20％）。 低浓度试液法 　以浓度比试液浓度 cx 稍高的参比溶液 cs 调T=0，用纯试剂 调T=100%，然后测定待测物质的透射率或吸光度。适用于痕量物质的测定。 一般应控制待测液的吸光度在0.2～0.7（透射率为65％～20％）。 以浓度比试液浓度 cx 稍高的参比溶液 cs 调T=0，用浓度比试液浓度 cx 稍低的参比溶液 cs 调T=100%，然后测定待测物质的透射率或吸光度。适用于任何浓度区域差别很小的试液的测定。 双标准示差分光光度法 一般应控制待测液的吸光度在0.2～0.7（透射率为65％～20％）。 五、动力学分光光度法 　利用反应速率与反应物、产物、催化剂浓度间的定律关系，通过测量吸光度对待测组分进行定量分析的方法。 （2）固定时间法 （3）固定吸光度法 （1）原理 　灵敏度高，选择性好，酶催化动力学分光光度法已广泛用于生化、环境保护、食品卫生、医药及临床检验等方面。 原 理 固定时间法 以不同浓度的催化剂溶液，测得相应的反应体系的A 值，作A－c 标准曲线，然后在相同条件和相同显色时间下测试液的吸光度，根据标准曲线求催化剂的浓度。 A = K1 c催 　 　以不同浓度的催化剂溶液，当吸光度上升至一固定数值时，测得相应的反应体系的反应时间t 值，作A－t -1 标准曲线，然后在相同条件和相同吸光度下测得试液的反应时间，由标准曲线求催化剂的浓度。 固定吸光度法 c催 = K2 / t　 六、导数分光光度法 吸光度的任一阶导数值与吸光物质的浓度成正比。 在定量分析中，可提高检测的灵敏度。 图中A与B 之间的垂直距离与苯的浓度成正比。 一般吸收光谱法，仅能检测约10 μg/mL的苯。 四阶倒数光谱，可检测低于1 μg/mL的苯。 七、纯度检查 苯在259 nm 有B 吸收带，甲醇或乙醇在此波长处几乎没有吸收。 八、氢键强度的测定 在极性溶剂中，物质吸收的光能，一部分用以实现 n→π* 跃迁，另一部分用以破坏