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基因工程的原理及技术 1 生物分子间特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。 据图回答： （1）过程①酶作用的部位是 键，此过程只发生在非结合区DNA，过程②酶作用的部位是 键。 （2）①、②两过程利用了酶的 特性。2012-7-13标记） （3）若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程③的测序结果与 酶的识别序列进行对比，确定选用何种酶。 （4）如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列基因的 。 （5）以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有 （多选） A.分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提rRNA “汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记） B.用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素 C．通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位2012-7-13标记） D．将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。 【答案】（1）磷酸二酯，肽2012-7-13标记） （2）专一（3）限制性内切酶 （4）启动子（5）AC、D 【解析】（1）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯键，蛋白酶作用的部位是肽键。 （2）①②过程利用了各种酶催化一种或一类化学反应的特性，即专一性。 （3）DNA要构建重组质粒，需要用限制性内切酶切割，再与质粒重组。 （4）RNA聚合酶识别和结合在基因的启动子上，驱动基因转录。 （5）蛋白酶能特异性的酶解蛋白质，分子杂交手段也是利用各物质分子结合的特异性，抑制成熟基因转录出的mRNA与催化成熟酶基因的mRNA碱基互补结合，也具有特异性，光和色素易溶于有机溶剂，与酒精并不是特异性的溶解，所以选ACD。2012-7-13标记）m] 【试题点评】本题考查了基因工程的想过知识，主要考查学生对知识的理解和应用能力，难度较小。 2 黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）回答下列问题： ( 1 ) AFB1属于 类致癌因子。 ( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上，使该位点受损伤变为G ，在DNA复制中，G 会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为 。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记） （3）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图 据图回答问题： ① 在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶．过程l 应选择 菌液的细胞提取总RNA ，理由是 ② 过程Ⅱ中，与引物结合的模版是 ③ 检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用 方法。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记） ( 4 ）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表： [来源:中国教育出版网] 2012-7-13标记） 【答案】( 1 )化学 ( 2 ) （3）①甲 甲菌液细胞的AFB1解毒酶基因已转录生成了mRNA，而在乙菌液细胞中该基因未转录 ②AFB1解毒酶基因的 cDNA. ③ 抗原-抗体杂交 (4）① AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量。 ② B组（或B组+A组） ③ 5 (5）脱氧核苷酸序列。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记） 【解析】黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。[来源:中国教育出版网] ( 1 ) 黄曲霉毒素B1（AFB1）是化学物质，AFB1属于化学类致癌因子。( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上．使该位点受损伤变为G ，在DNA复制中