实验室生物化学常规玻璃仪器使用教案分析.pptVIP

实验室生物化学常规玻璃仪器使用教案分析.ppt

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学习目的 说出生物化学检验实验室各种常规仪器的使用方法 学会血液、尿液标本的正确收集、处理与保存 说出微量加样器校正的目的及方法 离心机 转速(rpm) 相对离心力(RCF) 原理:利用离心机在高速旋转时产生的强大离心力,使悬 浮于溶液中密度不同的微粒依不同的速度沉降 从 耳达到分离.纯化.制备的目的. 用途:分离血清,沉淀蛋白质,收集细胞.细胞器等       RCF=1.118*10 *(rpm) *r 普通离心机6000rpm 高速离心机 (6000~25000rpm) 超高速离心机30000rpm 普通离心机 普通离心机的使用 1. 使用前应先检查调速旋钮(手柄)是否子啊起点位置“0”处,外 套筒有无破损,有无离心后的破碎残留物,如有应清理干净,其底 部应放有橡皮软垫。 2. 将待离心溶液倒入容积大小适宜的离心管内,盛液量不宜超过离心 管的2/3,以免溢出。然后放入离心外套筒。 3. 将一对装有离心管的外套筒置天平上,于离心管与外套筒间用自来 水加减法平衡至等重,然后对称放入离心机,并将不用的离心外套 筒取出,盖好离心机盖。 4. 接通电源,然后慢慢调节转速旋转,使转速逐渐增加至所需的离心 转速数。停机时,应先将调速旋钮拨回到几点“0”处,断电,待 其停止离心后再打开机盖,轻轻取出离心管。用完后,倒立外套同 使其干燥存放。 注意事项:放置离心机的位置应平稳,坚固,外接电源应为三眼插座 且地线接地良好。 高速离心机 高速离心机的使用 高速离心机技术方法 主要适用于分离、纯化、制备、分析高分子化合物及亚细胞组分。依其原理不同,其方法分差速离心法、速率区带离心法和等密度离心法三种。 1. 差速离心法;含有数种大小或密度不同颗粒的溶液,对密度差 速离心法将其分离成比较单一的组分。 该种方法操作简便,适用于分离大小和密度相差较大的颗粒,对密 度相差较小的颗粒,分离效果不甚理想。 2. 速率区带离心法;该法与差速离心法的区别在于,后者整个离心过 程都是在均一介质中进行,而速率区带离心法,则必须选择合适的 梯度介质,使样品在梯度介质中依其颗粒大小的不同进行分离 3. 等密度区带离心法;先在离心管内装入密度梯度介质,其密度沿离 心方向逐渐增加。在离心过程中,样品中不同密度的颗粒在离心力 作用下,分别迁移至与其密度相等的介质中而停止沉降,由此使不 同密度的颗粒停止在各自的等密度区带而得以分离。其沉降平衡主 要依赖于颗粒的密度,与颗粒大小及形状无关。该法分离纯化效果 好,但操作复杂。 高速离心技术用的转头 高速和超高速离心技术用的转头结构简单,但技术要求极高,因转头在高速旋转时受到很大内应力和拉力,长期使用会造成累积性塑性变形。内部结构细微缺陷,选择和使用不当会导致转头撕裂或爆炸事故。使用转头时,必须根据分离要求,正确选用转头。 高速离心机使用中注意事项 (1)两管重量必须平衡等重至1.0g (2)更换、取、放转头时,应小心轻放,不能与硬物碰 撞,必须反复检查转头的卡口是否对准。严格控制 转速在转头转速限制的90%内,不能满速,甚至超 速。 (3)高速运转前,离心室内一定要抽成真空,并降至规 定温度。 (4)离心过程中增减速度不能过快。 电热恒温水浴箱 二、电热恒温水浴箱 简称水浴箱 主要用于恒温水温,保持化学反应所需恒温条件。 加热装置浸入式电热管,温度控制为螺旋管式温控器,灵敏度一般 为±0.5℃ 1. 关闭水浴箱底部放水开关,注入水至适当深度,水位不能低于电热管。 2. 接通电源,打开开关,此时若红灯亮,表示电热管开始加热。调节温控旋钮至适当位置。 3. 观察温度计,当温度升志距所需约2℃时,逆时针方向旋转调温旋钮至红灯刚好熄灭。此后红灯不断熄灭,表示恒温控制器发挥作用,在继续观察一段时间温度升降变化情况,若与所需温度不符,只需略微调节温控旋钮直至达到所需恒定温度。 4. 调温旋钮刻度盘上的温度标本值与箱内水的实际温度不符,但可记录水箱内温度计所指示的温度与调温旋钮在刻度盘上的指示位置,并做好相应记号,在多次使用的基础上,就可比较迅速,准确地得到需要恒定的水温。 5. 若较长时间不使用,应将温控旋钮退回零位,打开放水开关,放尽水浴箱内水,保持箱内干燥,以免生锈。 电热恒温干燥箱 三、电热恒温干燥箱 电热恒温干燥箱又称烤箱,

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