产漆酶真菌的筛选、鉴定及酶学性质研究 (修复的4).docVIP

分类号： 学校代码：11460 学号南京晓庄学院本科生毕业论文 产漆酶真菌的筛选、鉴定及酶学性质研究Fungal laccase Screening, Identification and Characterization Study 所在院(系)： 生物化工与环境工程学院 学生姓名： 徐微圩 指导教师： 霍光明 研究起止日期：二○一三年五月至二○一四年五月 二○一四年五月 学位论文独创性声明 产漆酶真菌的筛选、鉴定及酶学性质研究 指导老师：霍光明 摘要: 本研究通过平板初筛和摇瓶复筛，筛选得到一株产漆酶菌株。根据菌株ITS rDNA 片段序列比对，将该菌株鉴定为Fusarium solani。F .solani漆酶的催化特性进行了研究。结果表明，F .solani漆酶的最适温度和最适pH值分别为50℃和6.5,该酶在45℃以下、pH5.5-7范围内较为稳定. 关键词：漆酶，液体发酵，性质 Fungal laccase ScreeningIdentification and Characterization Study Author:xu wei-wei Supervisor: Huo guang-ming Abstract：A novel laccase-producing strain was isolated from a lignin-containing sample by selective plates and flask fermentation, and the newly isolated strain was identified as Fusarium solani according to the analysis of internal transcribed spacer (ITS) rDNA gene sequences. Catalytic characteristics of the laccase from Fusarium solani were investigated. The laccase was stable within the range of PH5.5-7.0 and at the temperature lower than 45℃with the maximal activity at 50℃, pH4.5. Keywords: laccase, liquid fermentation, characterization 目录 第一部分：真菌漆酶（翻译） 4 第二部分：实验 18 引言 18 1、材料 18 1.1培养基 18 1.2培养条件 19 1.3 主要仪器和设备 19 1.4 试剂 19 2、方法 19 2.1 样品的采集 19 2.2 产漆酶菌株的初步筛选 19 2.3 产漆酶菌株的摇瓶复筛 20 2.4 漆酶活力测定方法 20 2.5 菌株鉴定 21 2.6 菌体生长的测定 22 2.7 酶学性质研究 23 2.7.1 漆酶的最适 pH 和最适温度…………………………………….…23 2.7.2 漆酶的 pH 稳定性和热稳定性…………………………………….23 3、结果与讨论 23 3.1 产漆酶菌株的初步筛选 23 3.2 产漆酶菌株的摇瓶复筛 24 3.3 产漆酶菌株的分类鉴定 24 3.4 最适反应 pH 25 3.5 最适反应温度 25 3.6 pH 稳定性 26 3.7 温度稳定性 26 4、结论 27 4.1 Fusarium 真菌功能 27 4.2 F .solani 漆酶活性评价 27 4.3 F .solani 漆酶进一步研究前景 27 参考文献 28 致谢 28 第一部分：真菌漆酶cupredoxine类型域。基于晶体和X射线衍射的研究发现虽然间和种内差异已经确定，但真菌漆酶之间结构上的差异仍不清楚。 关键词：生物技术的应用cupredoxine型域漆酶木质素降解 Yoshida（1883）是第一个描述在漆树胶乳中得到的漆酶。十年后，Bertrand将酶进行分离和纯化，并报告其作用机制(Bertrand, 1894;Yoshida, 1883)，此类活动是完全归因于高等植物和真菌。然而，现在它们已被从植物，真菌（子囊菌，担子菌和半知菌类）原核生物和节肢动物分离出(Giardinaet al., 2010)，因此漆酶是一种几乎无处不在的酶。 从昆虫中已分离出的漆酶，他们的主要功能是骨骼发生过程中的表皮角质层合成(Nakamura and Goa, 2005; Sakurai and Kataoka, 2007)。在细菌中漆酶具有多种功能，如形态发生过程中铜的平衡，色素的生物合成（如黑色素和褐色芽