Lowry’s法(Folin酚试剂法)测定蛋白含量解析.pptVIP

Lowry’s法（Folin-酚试剂法）测定蛋白质含量 Determination of protein content by Lowry‘s method 怎样测定血清中蛋白质的含量 蛋白质含量测定的常用方法比较 选择测定方法时应考虑 1、实验对测定所要求的灵敏度和精确度； 2、蛋白质的性质； 3、溶液中存在的干扰物质； 4、测定所花费的时间等。 Lowry’s法（Folin-酚试剂法）测定蛋白质含量 Determination of protein content by Lowry‘s method 实验目的 1、掌握Folin-酚试剂法测定蛋白质含量的原理 及其实验操作技术。 2、掌握制作标准曲线的要领和通过标准曲线 求样品溶液中待测定物质含量的方法 。 原理 1921年，Folin 首创，利用蛋白质分子中酪氨酸 和色氨酸残基（酚基）还原酚试剂（磷钨酸-磷钼酸）起蓝色反应。 1951年，Lowry对此法进行了改进，先于标本中加碱性铜试剂，再与酚试剂反应，提高了灵敏度。 原理 第一步：双缩脲反应 在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的多个肽键, 因此有双缩脲反应。 即在碱性