植物的组织培养技术要点分析.ppt

共 45 页 * (2)材料的选择 选取初花期的花,如月季一般选用完全未开放的月季花蕾,一方面保证花粉发育处于单核期;另一方面,若选取盛开或略开放的花,花瓣就有所松动,微生物就有可能侵入到花药,给材料消毒带来困难?而选择单核期以前的花药,则质地幼嫩,极易破碎? (3)花药开裂长出愈伤组织或释放出胚状体时,应及时转移到分化培养基上? 共 45 页 * (4)花粉植株的产生与植物茎的组织培养的比较 菊花茎的组织培养 月季的花药培养 理论依据 细胞的全能性 基本过程 脱分化?再分化 影响因素 选材?营养?激素?pH?温度?光照等 材料选取 未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 通常选择完全未开放的花蕾 光照状况 每日用日光灯照12h 开始不需光照,幼小植株形成后才需光照 操作流程 制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育 共 45 页 * 【例析2】 下图是水稻的花药通过无菌操作,培养产生花粉植株的两种途径的示意图?请据图回答下列问题: 共 45 页 * (1)图中的花粉应选自______________________________________的时期,花药培养成功率最高?图中的A是__________,C过程指___________,B指_____________? (2)这两种途径之间没有绝对的界限,主要取决于_____________________________________? 在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧 胚状体 诱导 生根 培养基中激素的种类及其浓度配比 共 45 页 * (3)配制培养基时加琼脂的目的是____________________________________________? (4)组织培养要求无菌操作的原因是_______________________________________________________________________? (5)要促进花粉细胞分裂和生长,培养基中应有___________和________两类植物激素? 使培养基呈固体状态,有利于外植体的生长 如不无菌操作,微生物会在培养基上快速繁殖,与离体培养的植物组织竞争 细胞分裂素 生长素 共 45 页 * [解析] (1)进行花药离体培养,花粉发育时期的选择非常重要,宜选取单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期? (2)图示两种途径的主要区别在于所使用培养基中激素的种类及浓度比不同? (3)培养基中加入琼脂可制成固体培养基? 共 45 页 * (4)由于微生物会在营养丰富的培养基上快速繁殖,与离体培养的植物组织进行竞争,故培养过程中应“无菌”操作? (5)植物组织培养过程中,生长素与细胞分裂素的应用对于外植体脱分化?再分化至关重要? 共 45 页 * [总结提升] 花药离体培养所得到的植株均为单倍体植株,植株特点表现为弱小且高度不育,故单倍体植株自身在生产上无实际使用价值,但若经人工诱导染色体加倍,则不仅可使单倍体植株恢复其可育性,而且植株均为纯合体——此方法即单倍体育种? 共 45 页 * 【互动探究2】 关于影响花药培养的因素的说法,不正确的是 ( ) A.材料选取和消毒是花粉植株诱导成功的关键 B.选择盛开的或略微开放的花作实验材料 C.亲本植株的生长条件?材料的低温预处理?接种密度都对实验有影响 D.应选择完全未开放的花蕾作实验材料 共 45 页 * [解析] 选择盛开的或略微开放的花作实验材料,花瓣有所松动,微生物有可能侵入到花药,给材料消毒带来困难,故B选项不正确?答案为B? [答案] B 共 45 页 * 技巧热点探究 植物组织培养的应用 【典例】 人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷?利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下: 共 45 页 * 请回答: (1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行________?接种前,要对人参进行________? (2)用于离体培养的根切块,叫做________?培养几天后发现少数培养基被污染,若是有颜色的绒毛状菌落?属于________________污染;若是有光泽的黏液状菌落,属于________污染? 灭菌 消毒 外植体 真菌(霉菌) 细菌 共 45 页 * (3)用少量________酶处理愈伤组织,获取单细胞或小细胞团,在液体培养基中进行悬浮培养,可有效提高人参皂苷合成量? (4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂,从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用_______________方法,操作时应采用________加热? 果胶 萃取(浸取) 水浴 共 45 页 * [思维导析] (1)进行植物组织培养时,培养基要