细菌的检查方法要点分析.pptVIP

（1）压滴法 2.染色标本检查法 细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类。 革兰氏染色（Gram stain) 革兰染色结果 结果： 革兰阳性（G＋）菌呈蓝紫色 革兰阴性（G－）菌呈红色 原理： （1）细胞壁结构：成分、肽聚糖层数等 （2）等电点： G＋等电点低，带负电荷多，与带正电荷的结晶紫结合牢固 革兰染色的临床意义： （1）鉴别细菌 （2）指导临床选择药物 （3）与细菌的致病性有关 （3）抗酸染色法 鉴别： 抗酸性杆菌和非抗酸性杆菌 步骤： 固定标本 苯酚复红加温染色 盐酸乙醇脱色 亚甲蓝复染 结果： 抗酸性杆菌染成红色 非抗酸性杆菌染成蓝色 （4）特殊染色法 鉴别： 细菌的荚膜、芽胞、鞭毛及细胞壁、异染颗粒等的染色 适用于专性厌氧菌培养。 厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等。 常用的生化试验 1、吲哚试验（Indol test）：含有色氨酸酶的细菌（如大肠杆菌、变形杆菌等）可分解色氨酸生成吲哚，若加入二甲基氨基苯甲醛，与吲哚结合，形成玫瑰吲哚，呈红色，称吲哚试验阳性。 吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）四种试验，合称之为IMViC试验，用以将大肠杆菌与其形状十分相近的肠杆菌属的细菌鉴别开来。 * * * * * （二）不染色标本检查法和染色标本检查法 不染色 标本 染色 标本 单染色 复染色 特殊染色 鞭毛、芽孢、荚膜 革兰染色、抗酸、albert 动力观察 载玻片 细菌悬液 盖玻片 1.不染色标本检查法 （2）悬滴法 镜检 盖玻片 细菌悬液 凹玻片 原理： 步骤： 意义： 鉴别细菌 选择抗菌药物 研究细菌致病性 结晶紫1min 卢戈碘 1min 95%乙 醇30s 稀释复红 30s 革兰染色 油镜下模式图 ×1000 ☆电子显微镜 2、甲基红试验：产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物，培养液pH＞5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，为甲基红试验阴性，大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液呈酸性pH＜5.4，指示剂甲基红呈红色，称甲基红试验（Methyl red test,MR）阳性。 3、V-P试验：大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖⊕，为区分两菌可采用VP试验及甲基红试验。产气杆菌能使丙酮酸脱羧、氧化（在碱性溶液中）生成二乙酰，后者可与含胍基的化合物反应，生成红色化合物，称VP阳性。大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，VP阴性。 4、枸橼酸盐利用试验（Citrate ultiliazation test）:能利用枸橼酸盐作为唯一碳源的细菌如产气杆菌，分解枸橼酸盐生成碳酸盐，同时分解培养基的铵盐生成氨，由此使培养基变为碱性，使指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿转为深蓝，此为枸橼酸盐利用试验阳性。 + + - - 产气杆菌 - - + + 大肠杆菌 枸橼酸盐利用 V.P.试验 甲基红试验 吲哚试验 IMViC试验： * * *