微生物的生长与生长环境要点分析.ppt

第6章 微生物的生长与环境条件 第一节 微生物的生长和测定方法 第二节 微生物的生长与环境条件 目的要求 1. 掌握微生物的生长和纯培养； 抑菌、灭菌、消毒和过滤除菌； 分批培养和连续培养的基本概念。 2.?掌握微生物生长的测定方法。 3. 掌握细菌群体生长的规律—生长曲线 4. 掌握环境条件对微生物生长的影响及应用。 第一节 微生物的生长和测定方法 1．生长的定义 在高等生物中， 生长：个体的增大；繁殖：个体数量的增加； 对微生物个体来说，生长与繁殖也是两个不同的过程。 微生物的生长：微生物群体 2. 微生物生长的测定方法 微生物生长： 单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化 个体计数-细胞数量的测定 微生物生长的测定： 群体重量测定-细胞生物量的测定 群体生理指标测定 1） 细胞数量的测定 直接测数法（测总数） 比浊法（测总数） 稀释平板计数法（测活菌数） 浓缩法 最大概率稀释法 直接测数法（测总数） 对象：单细胞微生物 ——细菌、酵母、孢子 工具：血球计数板，细菌计数板 优点：简便、快速、准确； 缺点：是难以区分死活细胞或与细菌类 似的杂质。 比浊法（测总数） 原理：在一定的浓度范围内，菌悬液中的细胞浓度与液体的光密度成正比，与透光度呈反比。 仪器：光电比色计 优、缺点：同直接测数法。 稀释平板计数法（活菌计数法） 原理：在充分稀释的条件下经培养由单个细胞长成一个单独的菌落，从菌落数可以计算样品中的细菌数。 优点：活菌数， 缺点：费工、费时、费料。 浓缩法 适用于检测微生物数量很少的水和空气样品。 最大概率稀释法 优点：可在一个混杂的样品中测定具有某种特殊生理功能类群的活菌数量。 2） 细胞生物量的测定 干重法： l mg干细胞≈4～5 mg湿菌 ≈4～5×l09 细胞， 总氮量测定法：细菌含氮量一般为12～15% DNA含量测定法：每个细菌细胞DNA含量 平均为8.4×10-5ng， 代谢活性法： 三. 细菌群体的生长 —生长曲线 growth curve 若以少量细菌纯种接种到一个装有无菌培养液的三角瓶中，在培养过程中，定时取样测定活菌数和总菌数，以其对数为纵坐标，以时间为横坐标，可以绘出一条S形的曲线，这就是生长曲线。 细菌群体生长的4个时期 1. 延滞期 lag phase 2. 对数期(指数期) logarithmic or exponential phase 3. 稳定期 stationary phase 4. 衰亡期 decline phase /death phase 1. 延滞期 细胞特征：个体变长， 体积增大， 代谢加强， RNA含量增加， 贮存物消失。 长短：菌种遗传性状、菌龄、接种前后培养条件的差异等。 2. 对数期(指数期) 表细胞生长旺盛，代谢活力强、分裂速度快，以几何级数增加，代时稳定。 细形态、生理、生化组成较为一致，适合于用作研究材料。 在工业发酵中作种子。 G值的计算 T0 T1 1 → 2 → 4 → 8 → … … … 20 → 21 → 22 → 23 → … … … 2n 1代 2代 3代 … … … n代 Nt = N0 X 2n , lgNt = n X lg2 + lgN0 , 即n = (lgNt - lgN0) / lg2 求得 G = t / n = 0.301t / (lgNt - lgN0) 3.稳定期 stationary 营养物质消耗，有害代谢产物积累、pH、Eh变化使生长速率下降、死亡率上升，两者平衡。 细体积较小，开始积累贮存物和次生代谢产物、芽胞细菌开始形成芽胞。 在工业生产中可通过补料、调温度、通气等措施来延长稳定期。 4. 衰亡期 营养物质消耗完，环境条件恶化，死亡率迅速上升