第八章液相色谱法.doc

酒泉卫生学校仪器分析教案 课程名称 仪器分析 班 级 专业，层次 检验，专科 教 师 专业技 术职务 授课方式 （小班，讲授，实习） 小班 学时 4学时 授课题目（章，节） 第八章 液相色谱法 基本教材或主要参考书 李吉学《仪器分析》北京：中国医药科技出版社，2000 孙毓庆 《分析化学》下册 (第4版).北京：人民卫生出版社，1999 教学目的： 1．掌握经典色谱的分离原理、条件选择和基本操作。 2．熟悉常见色谱法的应用。 教学内容： 1．常见液相色谱法的基本原理。 2．柱色谱法及其应用。 3．薄层色谱法及其应用。 4．纸色谱法及其应用。 教学方法：以讲授、举例为主；理论与工作中的应用相结合； 教 具：板书 教学重点，难点：色谱法的分离原理和机制。 重点：柱色谱法、薄层色谱法和纸色谱法的应用。 教研室审阅意见 （教研室主任签名） 年 月 日 教 学 内 容 辅助手段 时间分配 第八章 液相色谱法 首先了解本章的总体内容： 1、本章分四节内容：（1）概述 （2）柱色谱 （3）薄层色谱 （4）纸色谱 2、教学重点内容： （1）色谱法的分离机制 （2）三种液相色谱法的应用 第一节 概 述 一、色普法的发展过程：（举例） 1906年，俄国植物学家茨维特将植物色素提取物加到装有碳酸钙微粒的玻璃柱子上部，用石油醚洗柱子，形成不同的色带，结果色素得以分离。色谱法由此而来。随后的多年里，纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法及高效液相色谱法相继出现，使色谱学知识越来越丰富，成为目前分离科学的主导。 二、色谱法的概念： 又称层析法，根据混合物各组分在互不相溶的两相中吸附、分配或其他亲和作用的差异而建立的分析方法，称为色谱分析法。 三、色谱法的目的： 分离 定性、定量分析 四、常用术语：色谱柱、薄层板、固定相、流动相、填料 五、分类： 按两相所处的状态分类： 1、液相色谱 液-固色谱（LSC） 流动相为液体，固定相为固体吸附剂 教 学 内 容 辅助手段 时间分配 液-液色谱（LLC） 流动相为液体，固定相也为液体 2、气相色谱 ① 气-固色谱（GSC） 流动相为气体，固定相为固体吸附剂 ② 气-液色谱（GLC） 流动相为气体，固定相为液体 按分离机理分类： 1、吸附色谱法：固定相多为具有大比表面积的多孔吸附剂。包括气-固吸附色谱、液-固吸附色谱。 2、分配色谱法：基于不同组分在流动相和固定相之间的溶解分配能力的差异。包括气-液分配色谱、液-液分配色谱。 3、离子交换色谱法：使用具有离子交换功能团的材料作为固定相。 4、分子排阻色谱法：利用各组分分子的大小不同而在凝胶上产生的阻滞作用不同实现分离。 按操作形式分类： 柱色谱法：将固定相装于柱内，使样品沿一个方向移动而达 到分离。 纸色谱法：以滤纸作为载体，以其上面吸附的水作为固定相， 以流动相展开，进行分离。 薄层色谱法：将吸附剂涂于在平板上作固定相，用展开剂展 开进行分离。 第二节 柱 色 谱 按其原理有：吸附柱色谱、分配柱色谱、离子交换柱色谱、凝胶柱色谱。 液-固吸附柱色谱 画柱色谱图，举例讲解 分离原理：被分离成分在吸附剂和流动相中吸附、解吸、再吸附、再解吸，通过分配系数的不同进行分配、从而进行分离。 分配系数（K）：表示组分分配的程度。 教 学 内 容 辅助手段 时间分配 K=溶质在固定相中的浓度（CS）/溶质在流动相中的浓度（CS） 如果组份的K值小，CS小在固定相上保留作用弱，运动速度快，因此，限流出色谱柱。反之，组份的K值大，CS大，在固定相上保留作用强，运动速度慢，则该组分后流出色谱柱。 2、吸附剂：对不同的