紫兰组织培养快速繁殖技术研究.docVIP

紫兰组织培养快速繁殖技术摘要：用不同的培养基、植物生长调节剂及其配比系统地研究了组织培养技术。试验结果表明：MSMS＋6-BA0.5（mg/L）＋IBA0.1（mg/L）＋普通食用白糖30（g/L）时，对于诱导原球茎分化成苗效果明显。1/2MS＋NAA0.5（mg/L）＋GA1.0（mg/L）＋苹果汁200（g/L）则有利于紫兰的壮苗生根培养。关键词：；组织培养；原球茎； 紫兰(Bletilla striate)系兰科植物，因长期人工采挖，生态环境遭破坏，天然贮量日益减少。块茎繁殖在人工栽培条件下，1个球茎形成1～3个新球茎，年增殖率极低。本研究从无菌播种、基本培养基、植物生长调节剂种类与配比等环节探讨紫兰的组织培养技术，旨在探索行之有效的快速繁殖技术。这对于保护野生资源扩大栽培都具有十分重要的意义。材料　　紫兰试材。方法　　结果与分析无菌苗培育1／2 MS培养基小球体状(即原球茎)。幼叶继续培养长成具根的小苗。原球茎增殖和分化的一般情况　　原球茎经分割接种后左右，在原球茎表面开始形成纤细的白色绒毛，继续培养，产生1个或多个肉眼可见的乳白色的瘤状小突起即新原球茎的初期。随后，球状突起逐渐增大，呈浅绿色(新原球茎形成)。新形成的原球茎不经分割继续培养，有的形成丛生形的原球茎，有的形成芽和小植株。培养基植物生长调节剂对原球茎增殖的影响1基本培养基对原球茎增殖和分化的影响选用种基本培养基，即试验12、3）。将接种后60天的统计结果列于表1。 表1　基本培养基对原球茎增殖与分化的影响MS 50 187 57 50 163 55 50 179 58 H 50 64 27 50 69 23 50 68 26 white 50 22 32 50 21 35 50 23 31 由表1可见，在经过60天培养，3种培养基中都有原球茎与芽并存的现象。在MS培养基中，原球茎增殖个数最明显，且分化成芽数也在3种培养基中最多，并且新形成的原球茎短而粗，多数呈丛生形。无机盐14种(其中大量元素6种)、有机成分5种 (其中大量元素种)有机成分种无机盐种(其中大量元素种)、有机成分种对原球茎增殖和分化的影响把种子萌发形成的原球茎）50 213 47 2.0 50 79 35 KT 0.5 50 53 21 1.0 50 113 33 2.0 50 166 43 由表2可见，经60天培养，除以ZT2.0 mg/L的培养基中只有原球茎少量增殖外，其它配比中都有的增殖原球茎与分化芽并存的现象。原球茎增殖数经60天培养后以6－BA1.0 mg/L的培养基表现最多。6－BA0.5 mg/L和KT2.0mg/L的培养基次之，其它表现一般。分化成芽的个数以6－BA mg/L的培养基最好， 6－BA1.0 mg/L和KT2.0mg/L的培养基次之，其它一般，而ZT2.0 mg/L培养基则未能分化成苗。在附加KT的培养基上分化出的苗有10%～15%出现白化现象在以后的移栽中难以成活。中等质量浓度的BA(1.0 mg/L)对原球茎的增殖最为有利，而质量浓度的BA(0.5mg/L)对原球茎的最为有利。对原球茎增殖和分化的影响把原球茎）50 103 108 0.5 50 125 65 IAA 0.02 50 71 31 0.1 50 93 43 0.5 50 116 71 由表3可见，经60天培养，以上配比培养基中都有原球茎增殖与分化芽并存的现象。原球茎增殖数经60天培养以NAA0.1 mg/L的培养基表现最多；分化成芽的个数以IBA0.1 mg/L的培养基表现最好。所以，经上述试验，可以认为中等质量浓度的(0.1 mg/L)对原球茎的最为有利，BA(0.1 mg/L)对原球茎的最为有利。对原球茎增殖和分化的影响把种子萌发形成的原球茎）50 133 68 30 50 103 108 普通食用 白糖 10 50 59 51 20 50 129 63 30 50 97 97 由表4可见，经60天培养后，以上培养基中都有的原球茎与芽并存的现象。3种碳源对原球茎的增殖数和分化成芽的数目并没有显著差别。但是当3种碳源浓度为30（g/L）时，利于分化成芽，当3种碳源浓度为20（g/L）时，利于原球茎的增殖。从成本方面考虑，3种碳源对原球茎增殖和分化影响差异不大时，可以采用普通食用白糖代替其它碳源。 （四）不同添加物对紫兰无根苗生根壮苗的影响 NAA （mg/L） GA （mg/L） 苹果汁 （g/L） 1 0.2 0 0 2.5 1.3 0.20 3.1 0.19 2 0.2 1.0 0 4.8 2.5 0.19 4.7 0.20 3 0.2 0 200 4.3 1.6 0.29 3.