免疫球蛋白Immunoglobulin要点分析.pptVIP

内容提要 一、免疫球蛋白的结构 二、免疫球蛋白的异质性 三、免疫球蛋白的功能 四、各类免疫球蛋白的特性与功能 五、人工制备抗体 Ig的基本结构(IgG 为例) 重链与轻链 可变区和恒定区 铰链区 结构域 其它成分（J链和分泌片） 水解片段 第五节 人工制备抗体 多克隆抗体 Polyclonal antibody 单克隆抗体Monoclonal antibody 基因工程抗体 Genetically engineering antibodies 教学要求 掌握免疫球蛋白的基本结构及功能 掌握各类免疫球蛋白的特性与功能 熟悉单克隆抗体,多克隆抗体的概念 第四节 五类免疫球蛋白的特性与作用 IgG： *脾、淋巴结浆细胞产生 *IgG含量最多（占血清Ig总量的75%~85%） *半衰期较长 *唯一通过胎盘 *其他：调理吞噬、ADCC *主要抗感染的抗体 Characteristics and Functions of the five classes of Immunoglobulin IgA： *IgA1：血清中，85%，单体，全身作用 * IgA2：外分泌液，15%，双体，局部作用 IgM： *分子量最大，19s *无铰链区 *产生早 *调理、溶血比IgG强 * B抗原识别受体 正常人血清IgD浓度很低，平均约0.03mg/ml。IgD可在个体发育的任何时间产生。5类Ig中，IgD的铰链区较长，易被蛋白酶水解，故其半寿期很短（仅3天）。血清IgD的确切功能仍不清楚。B细胞表面的mIgD可作为B细胞分化发育成熟的标志，未成熟B细胞仅表达mIgM，成熟B细胞可同时表达mIgM和mIgD，这种B细胞也称为初始B细胞（naive B cell），活化的B细胞或记忆B细胞的mIgD逐渐消失。 IgD： 是正常人血清中含量最少的Ig，血清浓度极低，约为5×10-5 mg/ml。IgE为亲细胞抗体，其CH2和CH3功能区可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞上的高亲和力FcεRI结合，引起I型超敏反应。 IgE： Artifical Antibody 大多数抗原分子具有多个抗原决定基或称表位（epitope），每一种表位均可刺激机体一个B细胞克隆产生一种特异性抗体。传统制备抗体的方法是用包含多种抗原决定基的抗原物质免疫动物，从而刺激多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。因此，所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，称为多克隆抗体(polyclonal antibody，pAb)。 一、多克隆抗体：(polyclone antibody, pAb) 二、单克隆抗体：(Monoclonal antibody, McAb) 克隆是指由一个祖先细胞经分化、增殖所产生的遗传性状完全相同的细胞系或细胞群。 由单一B淋巴细胞克隆所产生的、只作用于某一特定抗原决定簇的均一抗体称为单克隆抗体（Monoclonal antibody，简称McAb）。 1975年，Kohler和Milstein采用细胞融合技术，使小鼠免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，后者即可产生只针对某一特定抗原决定簇的单克隆抗体。 杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤包括： （1）抗原制备 （2）免疫动物 （3）免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备 （4）细胞融合 （5）杂交瘤细胞的选择培养 （6）杂交瘤细胞的筛选 （7）杂交瘤细胞的克隆化 （8）单克隆抗体的检定 （9）分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立 （10）单克隆抗体的大量制备 即保持单克隆抗体均一性、特异性强的优点，又能克服其为鼠源性的不足。 三、基因工程抗体 将部分或全部人源抗体的编码基因克隆到真核或原核表达系统中，体外表达人-鼠嵌合或人源化抗体；或转基因至剔除自身抗体编码基因的小鼠体内，主动免疫诱生人源抗体。 人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体及人源抗体等。 Genetically engineering antibodies A type of glycoprotein molecule, also called immunoglobulin (Ig), produced by B lymphocytes, that binds antigens, often with a high degree of specificity and high affinity. Antibody Summary An antibody is a flexible Y-shaped molecule composed of four polypeptide ch