选修三专题一基因工程要点分析.pptVIP

生物 选修3现代生物科技专题 目 录 专题1 基因工程 专题2 细胞工程 专题3 胚胎工程 专题4 生物技术的安全性和伦理问题 专题5 生态工程 专题1 基因工程 基础理论和技术的发展催生了基因工程 20世纪中叶，基础理论取得了重大突破 1.DNA是遗传物质的证明 2.DNA双螺旋结构和中心法则的确立 3.遗传密码的破译 技术发明使基因工程的实施成为可能 1.基因转移载体的发现 2.工具酶的发现 3.DNA合成和测序技术的发明 4.DNA体外重组的实现 5.重组DNA表达实验的成功 6.第一例转基因动物问世 7.PCR技术的发明 基因工程的概念 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 转基因抗虫棉花 转入苏云金杆菌的一个抗虫基因，是中国目前最主要的转基因作物。 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来。 关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接。 关键步骤三： 抗虫基因导入受体（棉花）细胞。 通过观察抗虫棉的培育过程，你认为关键的步骤是什么？ 关键步骤一的工具：基因的剪刀——限制性内切酶。 关键步骤二的工具：基因的针线——DNA连接酶。 关键步骤三的工具：基因的运输工具——运载体。 1.1 DNA重组技术的基本工具 基本工具： 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” DNA连接酶——“分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 1、它的来源是哪里？ 2、它的种类有多少？ 3、它的作用是什么？ 4、DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段的 末端有几种形式？ 限制性核酸内切酶 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶是原核生物的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，使之失效，达到保证自身的安全的目的。 限制酶在原核生物中的作用是什么？ 因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解；含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 为什么细菌中限制酶不剪切本身的DNA？ 关于限制酶的说法中，正确的是 A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱 基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分 子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中 练习1： C DNA 连接酶有几种类型？ DNA连接酶的作用部位是什么？ 这两种酶的作用有什么不同？ DNA连接酶和DNA聚合酶有什么异同？ DNA连接酶 相同点： 两者都是形成磷酸二酯键。 不同点： DNA连接酶:是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板。 DNA聚合酶:是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接到正在合成的DNA单链中，形成一条与模板链互补的DNA链； 基因进入受体细胞的运载体 常用的运载体有哪些？ 质粒主要存在于哪里？ 质粒的特性： 是很小的双链环状DNA分子，在细胞染色体外能够自我复制。 作为运载体的条件： （1）必须有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到运载体上去。 （2）必须具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。 （3）必须带有标记基因，以便重组后进行重组DNA分子的辨认和筛选。 （4）必须是安全的，不会对受体细胞有害，也就是能够安全地“借居”在受体细胞中。 （5）分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作。 实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。 练习2、基因工程的载体，必须具备的条件及理由是( ) A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并 大量复制，以便提供大量的目的基因 B、具有多个限制酶切点，以便于目的基 因的表达 C．具有某些标记基因，以便为目的基因 的表达提供条件 D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存， 以便于进行筛选 A 练习3、质粒是基因工程最常见的载体，它的主要特点是( ) ①能自主复制 ②不能自主复制 ③大小合适 ④是蛋白质 ⑤是环状RNA