第3章氨基酸要点分析.pptVIP

第3章 氨基酸 氨基酸－蛋白质的构件分子 蛋白质的基本结构单位──氨基酸 一、 氨基酸的结构通式 二、二十种常见的蛋白质氨基酸分类、结构 及三字符号 三、氨基酸的性质 四、氨基酸混合物的分析分离 一、 α－氨基酸的一般结构 ① 与羧基相邻的α-碳原子上都有一个氨基，所以称为α-氨基酸（脯氨酸除外）。 ②只有连在α-碳原子上的R基团是可变的，即各种氨基酸的区别就在于R基的不同。 除R为H(即Gly)外，其余氨基酸的α-碳原子都为不对称碳原子（具有旋光性）。 α-碳原子上带有酸性的羧基和一个碱性的氨基，在一定条件下都可解离，是两性电离。 二、氨基酸的分类 蛋白质氨基酸： 蛋白质中常见的20种氨基酸 稀有的蛋白质氨基酸：蛋白质组成中，除上述20种常见氨基酸外，从少数蛋白质中还分离出一些稀有氨基酸，它们都是相应常见氨基酸的衍生物。如4-羟脯氨酸、5-羟赖氨酸等。 非蛋白质氨基酸：不参与蛋白质组成，在生物体内呈游离或结合态的氨基酸。 二、氨基酸的分类 根据侧链基团的结构将20中常见氨基酸分为3大类 丝氨酸（Ser, S） 苏氨酸（Thr, T） 半胱氨酸（Cys, C） 甲硫氨酸（Met, M） 根据R-基团的极性，将氨基酸分为两类： 非极性氨基酸 极性不带电荷 带正电荷的R基氨基酸 带负电荷的R基氨基酸 三、氨基酸的性质 两性解离和等电点 重要化学反应 光学性质 氨基酸的兼性离子形式 兼性离子：是指在同一个氨基酸分子上同时带有能解离出质子的-NH3+正离子和能接受质子的-COO-负离子，使同一氨基酸分子带有正、负两种电荷的离子形式。 氨基酸的解离 依照Bronsted-Lowry的酸碱质子理论，氨基酸在水中的两性离子既起酸（质子供体）的作用，又起碱（质子受体）的作用。 在适当的酸碱度时，氨基酸的氨基和羧基的解离度完全相等。此时，[正离子]=[负离子]，净电荷为零，在电场中既不向阳极移动，也不向阴极移动，成为两性离子。这时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点，以pI符号表示。 氨基酸的等电点求法： 以甘氨酸（Gly）为例 根据平衡常数公式可得： pH=pKa+lg[质子受体]/[质子供体] 氨基酸的带电状况与溶液的pH有关。改变pH可以使氨基酸带上正电荷或负电荷，也可使处于兼性离子状态。 当氨基酸完全质子化时（即处于酸性溶液时），再用碱滴定 结论： 氨基酸的等电点相当于该氨基酸的两性离子状态两侧基团pK值之和的一半。 即pI＝1/2（pKa1+pKa2） 侧链上有解离基团的氨基酸的pI如何计算？ （1）首先氨基酸完全质子化； （2）写出其解离方程式： ①先解离α-COOH, 再解离侧链基团上的COOH; ②再解离α-NH3+, 最后解离侧链基团上的NH3+。 （3）标出各解离步骤的pK值，最后以两性离子状态 两侧基团pK值之和的一半计算其等电点。 例如： （1）Glu的pK1(α-COOH)=2.19， pK2(γ- COOH)=4.25，pK3(α- NH3+)=9.67,计算其pI值。 （2）Lys的pK1(α-COOH)=2.18, pK2(α-NH3+)=8.95，pK3(ε- NH3+)=10.53，计算其pI值。 氨基酸等电点的计算 等电点的应用： 1.氨基酸在等电点时溶解度最小。 2.利用不同氨基酸等电点不同，可利用电泳的方式分离氨基酸。 氨基酸的化学反应 （一）由氨基参加的反应 （二）由羧基参加的反应( 自学 ) （三）由氨基和羧基共同参加的反应 （四）由侧链R基团产生的反应 (一)由氨基参加的反应 1. 与HNO2的反应 2. 酰基化和羟基化反应 3.形成西佛碱反应(自学) 4.脱氨基反应(自学) 1. 与HNO2的反应 2.酰基化和羟基化反应 氨基酸氨基的一个H可被酰基或烃基（包括环烃及其衍生物）取代，这些取代基对氨基酸的氨基有保护作用。 （1）酰基化试剂在多肽和蛋白质的人工合成中被用 作氨基的保护试剂。 酰化试剂：苄氧酰氯、叔丁氧甲酰氯、对-甲苯磺酰氯、 邻苯二甲酸酐 ★丹磺酰氯（DNS-cl，5—二甲基氨基萘-1-磺酰氯）常用于多肽链—NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定。 （2） 烃基化反应常用于蛋白质的N端氨基酸分析 A. 与二硝基氟苯的反应 B. 氨基酸与苯异硫氰酸（PITH）的反应 （三）由氨基和羧基共同参加的反应 1. 两性解离 2.与茚三酮的反应 3.形成肽键 4. 离子交换反应 3、成肽反应 4. 离