第八章生物传感器资料.pptVIP

3、酶联免疫吸附测定法 步骤如下：??? （1）抗体（或抗原）物理性的吸附于固相载体表面； （2）抗原（或抗体）与酶偶联，形成酶标抗原（或抗体）； （3）酶标抗原（或抗体）与相应的抗体（或抗原）结合后，然后通过酶催化底物产生颜色反应，颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例，从而实现定量测定。 双抗体夹心法（三明志法）原理 固相支持物表面 包被抗体 标记抗体 待测物 4、免疫传感器在医学上的应用 （1）绒毛膜促性腺激素（hGG）的测定 免疫胶体金法是将羊抗人HCG抗血清（多抗）、羊鼠IGG分别固定特制的纤维素试带上并呈两条线上下排列，羊抗鼠IGG线在 试带知下方为阴性对照，羊抗人HCG多抗在上方为测定。试带条中含均匀分布的胶体金标记鼠抗人β-HCG单克隆抗体和金标记鼠IGG。 将人hGG的抗体用化学固定化固定于经溴化氢活化处理的二氧化钛电极表面。 另外一只相同的二氧化钛电极结合尿素分子，构成参比电极。 将一对电极插入待测溶液中，电极变化与hGG浓度成正比。 （2）α-甲胎蛋白（AFP） 将AFP的抗体固定于氧电极的表面 测定时，将待测AFP的溶液中加入已知浓度的标记过氧化氢酶的AFP溶液。 将电极取出，放入含有过氧化氢的溶液中。 根据电流增加的速度计算AFP的量。 三、组织传感器 组织传感器利用天然动植物组织中酶的催化作用，本质上属于酶传感器。 1、优点 （1）与其他生物分子协调作用，性质稳定，寿命较长。 （2）酶处于天然状态和理想环境，催化效率高。 （3）组织传感器制作简便、价格便宜。 （4）生物组织可提供丰富的酶源，有利于共作。 2、尿素传感器 把大豆粉直接用戊二醛固定成膜，覆盖在氨或二氧化碳气敏电极上构成。 感应器：含有脲酶的膜。 换能器：平面pH电极。 3、腺苷传感器 用老鼠小肠黏膜细胞作敏感材料，用牛血清蛋白和戊二醛固定成膜，覆盖在氨气敏电极上构成。 三、微生物传感器 微生物传感器可以利用菌体中的复合酶、能量再生系统、辅助酶再生系统、微生物的呼吸及新陈代谢等全部生理机能，有可能获得具有复杂功能的生物传感器。 呼吸型的微生物传感器：利用微生物在同化底物时消耗氧的呼吸作用。 利用不同的微生物含有不同的酶，本质上属于酶传感器。 五、光导纤维生物传感器 将具有分子识别作用的固定化指示剂、酶、辅酶、生物受体、抗原、抗体、核酸、动植物组织、微生物等的敏感膜安装在光导纤维上，对样品中的待测物质进行选择性的分子识别，转换成各种光信息输出。 1、特点 具有很高的传输信息容量，可用同时反映出多远成分的多维信息。 探头直径可以小到nm级，能直接插入非整直空间和无法采样的小空间，对分析物进行连续检测。 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * * * * * * * * * * * （4）特点 一般不产生化学修饰，对生物分子的活性影响小，聚合物的孔径和形状可任意控制。 分子量大的分子在膜中扩散困难。 4、共价结合法 定义：是生物活性分子通过共价键与水不溶性载体结合的方法。 首先载体上引进活泼基团; 然后活化该活泼基团; 最后此活泼基团再与生物分子上某一基团形成共价键。 （1）共价键结合法制备固定化的“通式” （2）复合载体PEI-SIO2的制备 对硅胶进行活化处理：用甲烷磺酸水溶液； CP-SIO2的制备：用γ-氯丙基三甲氧基与硅烷反应，所制产物为氯丙基化的硅胶； PEI-SIO2复合载体制备：用聚乙烯亚胺（PEI）。 （3）特点 结合牢固、分子不易脱落、载体不易降解、寿命长。 操作步骤多、酶活性受影响，所以制备高活性的固定化酶比较困难。 5、交联法 是采用双功能试剂，如戊二醛等，将生物材料结合到惰性载体上的方法。 生物材料中参与偶联的功能团有：-NH2、-COOH、-SH、-OH、咪唑基和酚基等。 戊二醛有两个醛基，均可与酶或蛋白质的游离氨基反应,使酶蛋白交联。 （1）特点 操作简单，结合牢固，可以长时间使用。 严格控制pH，交联剂的选择也很重要。 6、微胶囊法 定义：将生物材料封闭于由膜组成的胶囊中的方法。 半透膜孔径酶分子孔径，小于半透膜孔径的小分子底物和产物可以自由进出，被称为“人工细胞”。 （1