工作汇报-帕金森资料.ppt

如果上边的实验成立，那么XXX 保护 PC12 细胞免受 PQ神经毒性作用的具体信号通路并不是十分清楚。本实验拟通过 PQ处理 PC12 细胞制备 PD 细胞模型，研究XXX对 PQ所致PC12 细胞损伤的保护作用的相关信号转导通路。 课题思路 有文献报道：PI3K/AKT、ERK信号转导通路在神经元保护中有着非常重要的作用： * 课题思路 * 存在疑问 * * Backups * * * * 课题思路 有文献报道：PI3K/AKT、ERK信号转导通路在神经元保护中有着非常重要的作用： 磷酸肌醇 3 激酶(PI3K)/Akt 信号转导通路是近年来发现的一条参与细胞增殖调控的重要信号通路。也是在各种损伤应激条件下发挥保护作用的一条重要信号通路，它可以促进氧化应激条件下心肌细胞和 PC12 细胞的存活。PI3K 和 Akt 是该通路的中心环节。 糖原合成酶-3β（Glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β）是Akt下游的一个激酶，参与调解细胞代谢过程的许多环节，包括糖原合成。GSK-3β在静息细胞呈组成性激活，细胞外刺激可通常通过一些激酶引起GSK-3βN末端的丝氨酸残基的磷酸化可导致其活性抑制，Akt可以通过磷酸化GSK-3β抑制其活性。GSK-3β可以参与调解PC12细胞的活性：转染组成性激活的GSK-3β可以诱导PC12细胞凋亡；而转染无活性的GSK-3β可以抑制凋亡。 胞外信号调节激酶（extracellular- signalregulated kinase，ERK）信号转导通路被认为是与细胞增殖、分化和促进细胞存活密切相关的信号转导途径，与 PI3K 通路类似，都可以在病理条件下保护促进神经元存活。 * MPP通过多巴胺转运体（DAT）进入可以直接PC12细胞，能选择性抑制线粒体复合体I 的活性， 破坏线粒体的呼吸功能，导致PC12细胞内ROS的形成、线粒体功能障碍引起一系列的继发性改变，最终导致细胞变性、死亡。ROS形成后通过破坏细胞膜脂质、裂解DNA进而导致凋亡。 * * PQ其有较强氧化能力, 在NADPH-细胞色素P-450还原酶、NADPH-细胞色素C还原酶、线粒体复合酶I等多种生物酶催化下发生还原反应生成PQ单阳离子自由基(PQ‘+) 及超氧自由基（O2-）。超氧自由基能从其他脂质膜中去掉氢原子, 引发一系列级联生化效应, 生成活性氧簇( reactive Oxygen species, ROS), 主要有过氧化氢( hydrogen peroxide,H2O2） 和羟自由基，引发细胞毒性效应, 致膜流动性降低, 通透性增大、脆性增加, 功能下降, 使细胞难以维持生理功能, 对其他自由基的攻击更加敏感。 黑质部位是锥体外系通路的重要环节, 具有较高的氧化代谢率, 富含高密度的不饱和脂肪酸, 特别易受自由基的攻击,对PQ的毒性十分易感。百草枯所致PD样小鼠黑质部位存在严重的氧化应激反应, 大量氧自由基生成, 使得超氧化物歧化酶( superoxide dismutase, SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione-Px, GSH-Px)过度消耗,多巴胺能神经元抗氧化损伤的能力明显下降。丙二醛为体内脂质过氧化反应的最终代谢产物, 组织丙二醛水平间接反映体内氧自由基的代谢状况, 也反映了组织受自由基攻击程度。 PQ引起PD的可能毒性机制 课题背景资料 * PQ可经 由 血 脑 屏 障(blood brain barrier ，BBB ) 内的中性氨基酸载体主动摄取至中枢神经系统，百 草 枯的结构同MPP+ 相 似，可 以 直 接 通 过BBB ，但 是 速 度慢、量也少。在 递 质 转 运 蛋 白如多 巴 胺 转 运 体(dopamine transporter，DAT ) 、L-氨 基酸转 运 体 的 帮 助 下 PQ能够更容易通过BBB ，达 到 其靶作用位点 。若同 时 摄 入 一 些 小 分 子 氨 基 酸( 如 缬 氨酸苯丙氨酸) 或 左 旋 多 巴，可 以 改 变PQ 的 摄 入 率，从而阻止PQ 在脑内的蓄积及其神经毒性。 PQ通过能量依赖转 运 入 纹 状 体 内，这 与 PQ在 肺内的聚胺摄取 系 统 类 似 。PQ被神经末梢迅速摄取后引发脂质过氧化，损伤并导致多巴胺能神经元数目的减少。PQ 染毒后小鼠纹状体中多巴胺 D1、D2受 体 和DAT的蛋白含量和基因表达降低，GBR-12909 ( 选 择 性多巴胺转运抑制剂) 可以阻止上述毒性 作 用。 目 前认为进入黑质或纹状体的PQ 可 能 通 过 下 述 3种 途 径 导致或诱发帕金森病。 课题背景资料 PQ