课题酵母细胞的固定化资料.pptVIP

2.1.5带芳香氨基线体 2.2辅酶的固定方法 辅酶的固定方法主要有两种：载体结合法和包埋法。载体结合法与捕基固定方法相似，主要用于制备亲和吸附利。包埋法中，由于辅酶相对分子质量小，先将辅酶与水溶性高分子结合，然后再来包埋。这种包埋和酶的包埋法相似。因此，辅酶固定化包括：引入一个功能基团，生成辅酶衍生物，再与水溶性高分子聚合物结合。 2.2.1引入功能基团 对于一些腺苷酸的辅酶，如NAD+、NADP+、CoA和ATP等，在腺嘌呤的第6位或第8位上引入氨基或羧基。其反应分别如下： 2.2.2高分子化 选择高分子化合物时，首先要考虑的是 其溶解度大、分子大小适当，既能保持在半适膜内，又不会过大地增加粘度而影响活性；其次是，高分子大小、结构、亲水性、解离基团、结合量等都影响高分子化辅酶的活性。一般引入羧基的辅酶，用碳二亚胺缩合反应使其与聚Lys、聚乙亚胺结合，形成水溶性高分子化合物；引入氨基的辅酶， 一般用BrCN活化后，再与水溶性多糖类(如右旋糖苷)结合，而高分子化。 酶反应器中，使用高分子辅酶衍生物还有捕酶的再生 问题。一般采用与主反应共组合和独立进行二种方式来解决。如下页图： 在实践中，许多重要的生物活性物质或生化药物的生物合成中，尚需辅酶参加酶反应，所以，辅酶的固定化和固定化辅酶的再生是酶工程的一项重要任务。目前．尚未见用于工业生产的报道。 3