th甾体及其苷类资料.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 蜗牛酶（一种混合酶，蜗牛肠管消化液经处理而得）几乎 能水解所有的苷键，能将强心苷分子的糖逐步水解，直至获得 苷元，常用来研究强心苷的结构。 第二节 强心苷类 * * （四）、显色反应 1.甾体母核的反应 Liebermann-Burchard反应： 2.不饱和内酯环的反应 甲型强心苷结构中的五元不饱和内酯环在碱性溶液中发生双键移位，产生活性亚甲基，可与某些试剂反应产生颜色。乙型强心苷不发生反应。 第二节 强心苷类 * * 1）Legal反应： 试剂：亚硝酰铁氰化钠，现象：深红色。 ?? 2）Kedde反应 ??试剂：3,5-二硝基苯甲酸，现象：紫红色。 3）Baljet反应 试剂：碱性苦味酸，现象：橙色或橙红色 4）Raymond反应：试剂：间-二硝基苯，现象：紫红或蓝 第二节 强心苷类 * * 3. 2-去氧糖的反应 1)．Keller-Kiliani反应?（K-K反应） 强心苷冰醋酸溶液，加少量FeCl3，沿管壁加浓H2SO4，上层（冰醋酸层）渐呈绿色或蓝绿色，界面颜色随苷元而不同。 该反应只对游离2-去氧糖或在此条件下能水解出2-去氧糖的苷显色。 例如：紫花毛地黄苷A和毛地黄毒苷，它们虽都有三分子毛地黄毒糖，但前者的呈色深度为后者的2/3，这是由于前者在此条件下只能水解二分子毛地黄毒糖，另一分子毛地黄毒糖与葡萄糖相连，较难水解而不能褪色。 第二节 强心苷类 * * 3) 对-二甲氨基苯甲醛反应： 4) 过碘酸-对硝基苯胺反应：现象：黄色 2)．Xanthydrol反应 强心苷固体少许，加占吨氢醇试剂，加热3分钟，显红色。 只要分子中有2-去氧糖，均呈阳性反应。 强心苷醇溶液滴在滤纸上 晾干 喷对-二甲氨基苯甲醛试剂 90 ℃加热30min 灰红色斑点 第二节 强心苷类 * * 五、提取分离 (一）提取 1.原生苷的提取：新鲜药材为原料，抑制酶的活性。原生苷易溶于水、醇等极性溶剂，难溶于亲脂性溶剂，故用70％～80％EtOH提取。 2.次级苷的提取：利用酶的活性，25～40℃进行酶解。次级苷易溶于亲脂性溶剂而难溶于水。一般用CHCl3提取，也可提取原生苷再进行酶解，酶解完全后再用CHCl3萃取。 第二节 强心苷类 * * (二）纯化 1.溶剂法 原料如果是种子或含油脂多时。 1)先用压榨法或溶剂法脱脂，然后再用醇或稀醇提取。 2)也可以先用醇或稀醇提取，提取液浓缩去醇后再以石油醚萃取脱脂，用氯仿-甲醇萃取除去亲水性杂质。 第二节 强心苷类 * * (二）纯化 1.溶剂法 第二节 强心苷类 * * (二）纯化 1.溶剂法 第二节 强心苷类 * * 如果是药材地上部分，叶绿素含量会比较高，除去方法： 80%乙醇醇提液 浓缩（保留适当浓度的醇） 放置 叶绿素等脂溶性杂质成胶状沉淀析出 过滤除去 CHCl3-MeOH萃取 强心苷 第二节 强心苷类 * * 2.铅盐沉淀法 ?? 铅盐可与一些成分（黄酮、醌类、多糖、皂苷等）生成沉淀，与强心苷类成分分开。 但铅盐与杂质生成的沉淀能吸附强心苷而导致损失。这种吸附和溶液中醇的含量有关。 当溶液中醇浓度 时，能降低沉淀对强心苷的吸附，但若醇浓度太高，则纯化效果 . 例如：提取毛地黄强心苷时，水提取液用碱性Pb(AC)2试剂处理，强心苷损失达14％，若增加含醇量为40％，则并无损失，若醇的量大于50％，，则纯化效果差。 第二节 强心苷类 * * 3.吸附法： 活性炭柱吸附法：稀醇提取溶液中叶绿素等脂溶性杂质被吸 附而除去 氧化铝柱吸附法：提取液中皂苷、多糖等水溶性杂质被吸附 而除去 第二节 强心苷类 * * (三）分离 1.重结晶法：适用于含量高的强心苷 2.两相溶剂萃取法 ???利用强心苷在两种互不相溶的溶剂中的分配系数不同进行分离。 毛花毛地黄中苷A、B、C的分离。 CHCl3 CH3OH H2O 苷A 1:225 1:20 几乎不溶 苷Ｂ 1：550 1：20 几乎不溶 苷C 1：2000 1：20 几乎不溶 用CHCl3-CH3OH-H2O(5:1:5)为溶剂系统进行两相溶剂萃取（溶液用量为总苷的1000倍）。 CHCl3 层：苷A和B；水层：苷C 第二节 强心苷类 * * 3.逆流分配法 利用分配系数不同进行分离