虎奶菇与大球盖菇原生质体融合研究技术报告.docVIP

附件5： 分类编号： 单位代码：10065 密 级： 学 号： 研究生学位论文 论文题目： 虎奶菇与大球盖菇原生质体 融合研究 学 生 姓 名： 张越 申请学位级别： 硕士 申请专业名称： 植物学 研 究 方 向： 蕈菌生物学 指导教师姓名： 郭成金 专业技术职称：教授 提交论文日期： 2013年6月3日  Tianjin Normal University Master Dissertation Studies on the protoplast fusion between Pleurotus tuber - regium and Stropharia rugosoannulata ZHANG YUE Major: Botany Direction: Mushroom Biology Adviser: GUO Cheng-jin June 2013学位论文保密证明 研究生姓名：张越 学位级别：硕士 级别：保密 学院：生命科学学院 专业：植物学 毕业论文题目：虎奶菇与大球盖菇原生质体融合研究 保密原因：论文数据尚未发表。 保密时间：2013年5月-2016年5月 研究生签名：张越 导师签名： 所在学院：（盖章） 研究生学院：（盖章） 原创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得天津师范大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 论文作者签名： 日期： 2013年 6月 3日 研究生学位论文使用授权说明 （必须装订在提交学校图书馆的印刷本） 本人完全了解天津师范大学关于收集、保存、使用研究生学位论文的规定，即： 按照学校要求向图书馆提交学位论文的印刷本和电子版本； 图书馆有权保存学位论文的印刷本和电子版，并通过校园网向本校读者提供全文与阅览服务。 图书馆可以采用数字化或其它手段保存论文； 因某种特殊原因需要延迟发布学位论文，按学位论文保密规定处理，保密论文在解密后遵守此规定。 论文作者签名： 导师签名： 日期： 年 月 日  摘要 虎奶菇（Pleurotus tuber - regium ( Fr1 ) Sing ( 1951年) ） （Stropharia rugosoannulata Farlow）FAO）向发展中国家推荐栽培的十大食用菌之一。实验通过原生质体融合技术，首次对科间虎奶菇与大球盖菇原生质体融合、再生进行了研究，并对融合子进行了初步的筛选和鉴定，期望能够获得同时具有两亲本优良性状的融合子，为新品种选育，细胞融合技术的研究以及医药业与食品业的进一步发展奠定基础。 通过正交实验，对虎奶菇和大球盖菇液体培养基组成、原生质体制备、再生和融合进行了详细的研究，实验结果为： 虎奶菇最佳液体培养基为麦芽糖1.50%，蔗糖2.50%，酵母粉0.20%，麦麸2.00%，MgSO4·7H2O0.09%，KH2PO40.18%，VB16mg，8.23 g/L。 大球盖菇最佳液体培养基组成为葡萄糖1.00%，3.00%，酵母粉0.25%，蛋白胨0.20%，MgSO4·7H2O0.12%，KH2PO40.21%，VB18mg/L，运用此培养基培养菌丝，生物量可达9.30 g/L。 虎奶菇原生质体最佳制备条件为取培养3d的菌丝体，以0.60mol·L-1甘露醇作为渗稳剂，在1.50%L酶液中，30℃酶解1h，原生质体得率最高，可达1.19×107。最佳再生体系为取培养9d的菌丝体，利用0.6mol·L-1的蔗糖作为渗稳剂，在1.00%溶壁