基因工程的基本操作步资料.ppt

常见转化方法 （1）将目的基因导入微生物细胞——感受态细胞法 ①农杆菌转化法：双子叶植物和裸子植物。 （2）将目的基因导入植物细胞 ③基因枪法：单子叶植物。 ②花粉管通道法：双子叶植物。 （3）将目的基因导入动物细胞——显微注射法 ③常用法： ②常用菌： ①微生物作受体细胞原因： 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 ④过程： 大肠杆菌 Ca2+处理获得感受态细胞 Ca2+处理 大肠杆菌 感受态 细胞 表达载体 与感受态 细胞混合 感受态细胞 吸收DNA ___感受态细胞法 （1）将目的基因导入微生物细胞 若通过基因工程生产人的糖蛋白可以用大肠杆菌作为工程菌吗？ 不可以，糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成，而内质网和高尔基体存在真核细胞中，大肠杆菌是原核生物，细胞中不含这两种细胞器。 以酵母菌作为工程菌可以吗? 可以，酵母菌为真核生物（真菌类）。 将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点： 易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力 ②原理：Ti质粒上的T---DNA可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上。 ③过程： （2）基因枪法 （3）花粉管通道法 将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵）