DNA重组技术的工具(用)解读.pptVIP

基因工程 基因工程又叫做 或 。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种 提取出来，加 以 ，然后放到另一种生物的细胞里， 改造生物的遗传性状。 　 限制性核酸内切酶 DNA重组技术的工具 来源： 二、基因进入受体细胞的运载体 质粒 运载体 种类 三、DNA连接酶 DNA连接酶 磷酸二酯键 DNA连接酶 * 专题1 基因工程 基因拼接技术 DNA重组技术 基因 修饰改造 定向地 基因工程名称 结果 操作水平 操作对象 操作环境 原理 DNA分子水平 基因拼接技术或DNA重组技术 基因重组 生物体外 基因 人类需要的新的生物类型和生物产品 “基因的剪刀”—— “基因的针线”—— “基因的运输工具”—— 1.1、DNA重组技术的基本工具 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 运载体 一、限制酶 EcoRⅠ 黏性末端　　　　 黏性末端 Go back SmaⅠ 平末端　　　平末端 黏性末端 磷酸二酯键 平末端 DNA 限制酶 简称 识 别 切 割 形成 限制酶 运载体 特点： 种类： DNA连接酶 同种限制酶切割后留下的黏性末端相同 结果： 作用： 常用的运载体： 动植物病毒 λ噬菌体的衍生物 将外源基因送入受体细胞 质粒的特点 1、结构简单，大小适中，便于在体外操作 运载体 2、有一个至多个限制酶切割位点，便于与外源基因连接（形成重组DNA分子） 3、导入受体细胞后能稳定保存、复制，便于提供大量的目的基因 4、有某些遗传标记基因，便于鉴定与选择 5、对受体细胞无害 动植物病毒 λ噬菌体的衍生物 质粒 化学成分 细菌和酵母菌体内 位置 特点 DNA分子 注意：真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。 分子缝合针：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 作用： 种类： 特点： 无特意识别功能，只要末端可以互补配对即可连接 T4 DNA连接酶 E.Coli DNA连接酶 连接磷酸二酯键 大肠杆菌 T4噬菌体 连接 连接 连接 黏性末端 平末端 E.Coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来， E·coli DNA连接酶　　　　　　　　或T4DNA连接酶 即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 　 T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低 T4DNA连接酶 “分子缝合针” DNA连接酶 种类 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 连接末端类型 共性 T4噬菌体 大肠杆菌 只能连接黏性末端 既可连接黏性末端，又可连接平末端。 这两种连接酶催化反应基本相同，都是连接双链DNA的缺口，而不能连接单链DNA。 抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白晶体，能使棉铃虫等鳞翅口害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物，使作物自身具有抵御虫害的能力。 抗虫棉 取出 导入 普通大豆 抗草甘膦基因 矮牵牛 DNA连接酶与DNA聚合酶一样吗？为什么 DNA连接酶 DNA聚合酶 作用实质（部位） 是否需模板 连接 DNA链 作用过程 作用结果