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第五章 黄连不同炮制品中主要生物碱体内分布研究 黄连为毛茛科多年生草本植物黄连CoptischinensisFranch的根茎[1],其活性成分为黄连生物碱。石柱黄连(味连)含小檗碱50%左右,而小檗碱、药根碱、巴马汀和黄连碱等4个生物碱之和占总生物碱的90%左右[2]。有关小檗碱的药代动力学研究较多[3-4],其他黄连生物碱的药代动力学研究相对较少[5]。中药成分在动物体内的代谢与作用网络具有/网通虹势规律[6-7]:中药材成分群往往是同一母核的多种衍生物,药理作用相似;同一母核的有效成分衍生物群在动物内可以相互抑制、加速及转化,其代谢网络相容相通;动物内存在巨大的与自然界类似的以CYP450酶为主导的代谢酶网络系统,按CYP450进化树的关系对中药及复方成分组群进行代谢和产生药效。黄连生物碱的结构类似,均是异喹啉类生物碱的衍生物。这些生物碱之间在动物体内是否存在相互之间的转化。 黄连为毛茛科植物黄连（Coptis chinensis Franch.）、三角叶黄连（Coptis deltoidea C.Y.Chenget Hsiao）、或云连（Coptis teeta Wall.）的干燥根茎。具有清热燥湿、泻火解毒功效，始载于《神农本草经》，列为上品[1]（[1]魏?吴晋等述.神农本草经.清?孙星衍，孙冯翼辑.北京：人民卫生出版社，1982.26））(10): 1170）(3):3441)。 本研究以黄酒为辅料，经炒制、蒸制炮制方法处理后，黄连不同炮制品所含主要生物碱在体内不同组织脏器的分布情况，力图从体内分布角度揭示“三焦”理论。 1． 材料 1.1 动物 SD小鼠,体重(18-20 g),雌雄各半,由南京中医药大学动物中心提供,合格证号SCXK(渝)2007-0001。 1.2 仪器与试剂 （1）仪器： 液质联用系统： SHIMADZU UFLC XR超快速液相色谱仪 （日本岛津公司， 包括LC-20AD型输液单元，STL-20A XR 型自动进样器，CTO-20AC 型柱温箱）；AB SCIEX QTRAP 5500 型质谱仪（美国 AB SCIEX 公司），Analyst 1.5 软件；KQ5200DA型数控超声波清洗器； TG16-W微量高速离心机,组织匀浆器。 （2）试剂：盐酸药根碱（纯度≥98%，批号960383-96-4;表小檗碱（纯度≥98%，批号MUST；黄连碱（纯度≥98%，批号3486-66-6）；盐酸巴马汀（纯度≥98%，批号10605-02-4）；盐酸小檗碱（纯度≥98%，批号633-65-8）；四氢巴马汀（ ）等均购自成都曼思特生物科技有限公司,含量98%以上；其他试剂均为分析纯或色谱纯。 1.3 药材及炮制方法 黄连采挖自湖北省恩施州利川市佛宝山官康彬农户五年生黄连，经南京中医药大学陈建伟教授鉴定为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.），习称“味连”N2)为50 Pa，辅助气 ( GS1 N2)为50 Pa，去簇电压( DP)为 70eV; 检测电压1.6KV。 2.2溶液配制 （1）内标物溶液配制：称取四氢巴马汀对照品适量，用甲醇配制成浓度为200ng/mL。 （2）对照品溶液配制： 非洲防己碱对照品溶液配制：称取非洲防己碱约2mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，使其浓度为202μg/mL。 黄连碱对照品溶液配制：称取黄连碱约2mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，使其浓度为182μg/mL。 盐酸药根碱对照品溶液配制：称取盐酸药根碱约2mg，精密称定，置50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，使其浓度为42μg/mL。 盐酸巴马汀对照品溶液配制：称取盐酸巴马汀约2mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，使其浓度为222μg/mL。 盐酸小檗碱对照品溶液配制：称取盐酸小檗碱约2mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，使其浓度为235μg/mL。 表小檗碱对照品溶液配制：称取盐表小檗碱约2mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，使其浓度为211μg/mL。 木兰花碱对照品溶液配制：称取木兰花碱约2mg，精密称定，置10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，使其浓度为226μg/mL。 （3）混合对照品溶液配制：从上述对照品溶液中，分别精密移取非洲防己碱对照品溶液800μL、黄连碱对照品溶液800μL、盐酸药根碱对照品溶液240μL、盐酸巴马汀对照品溶液800μL、盐酸小檗碱对照品溶液800μL、表小檗碱对照品溶液800μL、木兰花碱对照品溶液800μL置100mL容量瓶中，甲醇定容至刻度。精密移取上述混合对照品溶液3mL，置50mL容量瓶，用甲醇稀释至刻度，使其浓度分