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解析:(1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层,细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。(2)植物组织培养时,对外植体常用酒精和氯化汞消毒,对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌;紫外线能使蛋白质变性,还能损伤DNA的结构;可通过在适宜的温度下放置灭菌过的培养基看其是否有菌落产生来确定培养基灭菌是否彻底。(3)醋酸菌为需氧型生物。(4)最常用的微生物接种方法有平板划线法和涂抹平板法。(5)因一个菌落可由多个连在一起的细菌形成,所以计算得出的细菌数一般低于实际数目。(6)用选择培养基筛选目的菌——尿素分解菌,加入酚红指示剂,若存在尿素分解菌,指示剂变红色。 本部分内容讲解结束 按ESC键退出全屏播放 (3)接种技术的核心是_________________________________。在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步______________________,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是______________________________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。 防止杂菌污染,保证培养物的纯度 稀释获得单个菌落 培养基中缺少这些细菌可利用的氮源 (4)在培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是________,有透明带菌落利用的氮源主要是 ____________________,据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A~E五种菌株中,________是最理想菌株。 氮气 该除草剂 E (5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B,然后对突变株A和B进行实验,结果如下表所示: 接种的菌种 一般培养基 实验处理及结果 A 不生长 添加营养物质甲,能生长 B 不生长 添中营养物质乙,能生长 A+B 能生长 不添加营养物质甲、乙就能生长 突变株A不能在一般培养基上生长的原因是 ________________________________________________。 突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是_____________________________________________________ _______________________________________________。 突变株A缺乏合成营养物质甲所需要的酶 突变株A生长需要营养物质甲,突变株B可以提供;突变株B生长需要营养物质乙,突变株A可以提供 [解析]因该除草剂为含氮有机物,故所用培养基应是以除草剂为惟一氮源的选择培养基。接种要在酒精灯火焰旁进行,以防止杂菌污染,保证培养物的纯度。在该种选择培养基上固氮和能分解除草剂的微生物均能生长,但固氮微生物菌落周围无透明圈。E菌落周围的透明圈最大,说明该菌落中的微生物分解除草剂的能力强。 方法 平板划线法 涂抹平板法 注意 事项 微生物的纯化培养——平板划线法与涂抹平板法 (1)接种环的灼烧 ①第一次划线前:杀死接种环上的微生物,避免污染培养物 ②每次划线前:杀死残留菌种,保证每次划线菌种来自上次划线末端 ③划线结束后:杀死残留菌种,避免污染环境和感染操作者 (1)稀释操作时:每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰1~2 cm处 (2)涂抹平板时 ①玻璃刮铲用体积分数为70%的酒精消毒,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的玻璃刮铲在酒精灯火焰上引燃 方法 平板划线法 涂抹平板法 注意 事项 目的 培养 (2)灼烧接种环之后,要冷却后再进行取种,以免温度太高杀死菌种 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连 (4)划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破 ②不要将过热的玻璃刮铲放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精 ③酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体 在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落 平板冷凝后倒置培养,使培养基表面的水分更好地挥发,防止皿盖上水珠落入培养基造成污染 【高考警示】 (1)两种接种方法作用不完全相同:平板划线法和涂抹平板法都能使细菌纯化,但平板划线法不易分离出单个菌落,不能计数;涂抹平板法能使单菌落分离,便于计数。 (2)涂抹平板法的缺点:涂抹平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。 划线 涂抹平板 (2013·高考新课标全国卷Ⅱ)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题: (1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用________
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