第十二章核酸的代谢解读.ppt

原核生物DNA复制特点 只有一个复制起点 复制连续开始，表现为一个复制单元多个复制叉 移动速度快 SOS—求救信号 DNA损伤严重，复制受到抑制，前几种方法难以奏效时： 2.复合体甩掉δ亚基，随RNA聚合酶移动连续5`→3`转录RNA链。 真核生物rRNA的初始转录为45S前体，经过加工成 18S、5.8S和28S rRNA。 个别噬菌体RNA病毒进入宿主细胞后，RNA以自身为模板，两次复制，形成病毒RNA。 ④转录的基本过程 （2）原核生物的转录 ①RNA聚合酶（转录酶，依赖DNA的RNA聚合酶） ②转录过程：起始→延长→终止三个阶段 ①RNA聚合酶（依赖DNA的RNA聚合酶；转录酶） ▲模板：DNA ▲底物：NTP，从5`→3`方向聚合， 由DNA上3`→5`滑动。 ▲不要引物，但要Mg2+等。 ▲产物：各种RNA。 大肠杆菌RNA聚合酶基本情况： ? 2ββ′ + ? = 全酶 核心酶 识别起始 ② 转录过程：起始→延长→终止三个阶段 起始阶段 ◎转录单位：一个转录事件从起始到终止的DNA区间称为一个转录单位，转录起点左边的DNA顺序称起始点上游顺序；起始点右边的顺序称为起始点下游顺序。而转录起始点则是第一个核糖核苷酸掺入RNA的位点，因此相应的DNA位点的碱基对记为+1，从这一点开始下游的碱基数记为正数，上游的碱基对数记为负数。 ◎转录的起始： （1）RNA聚合酶σ因子识别并结合于启动子的-35区（识别位）； （2）核心酶结合上去形成全酶； （3）全酶沿模板DNA3`→5`方向移动至-10序列，即Pribnow框（是A-T富集区，使该区域的Tm值低，容易解链），此时，聚合酶与模板DNA紧密结合形成稳定的复合物。 （4）在Pribnow框打开局部DNA双螺旋即开始转录。解开局部双螺旋的长度一般为17个bp。 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 延长阶段 RNA的合成不需要引物，所以可根据DNA的一条链的碱基序列选择第1个和第2个核苷三磷酸合成第1个磷酸二酯键，第一个起始的核苷酸约80%是pppG或pppA.。 pppG（或pppA）+NTP→5`pppGpNOH+PPi 转录空泡： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA DNA/DNADNA/RNA G-CA-TA-U 当第一个磷酸二酯键合成后，σ因子就从全酶上解离下来，σ因子的解离使酶与DNA结合就不那么紧密，这便于核心酶沿DNA链的3`→5`方向移动，边移动边打开DNA双链，边按模板链的顺序使一个个核苷酸在3`-OH端接上去，RNA链就延长，RNA链的合成方向是5`→3`。链的延长由核心酶催化，就目前所知，可能是由β-亚基催化的。 终止阶段 ●终止子的概念： 转录的RNA上有一段特殊序列起终止作用—终止子 ●终止的两种类型 不依赖ρ因子（终止因子）的终止。 依赖ρ因子的终止。 不依赖于ρ因子的终止结构，其DNA链的3`-端附近有回文结构，富含G-C碱基，随后紧密相连的是A-T碱基，当以这段终止信号为模板转录出的RNA即形成具有茎环的发夹形结构，其3`-端含有一串UUUU…..的尾巴，这发夹结构阻碍了聚合酶的进一步延伸，RNA链的合成即终止，寡聚U可能提供信号使RNA聚合酶脱离模板。 ●不依赖ρ因子的终止结构 富含G、C区 可形成茎-环结构（发夹结构） 一端含有连续多个U（PolyU尾巴） 依赖ρ因子终止结构 无丰富G、C区及PolyU尾巴 可以形成茎-环结构 有一特定序列 依赖ρ因子的终止，其DNA链的3`-端附近的回文结构没有富含G-C区，后面也没有连续的A存在，需ρ因子的参与才能完成链的终止。 ρ因子是由ρ基因编码的蛋白质。一般认为ρ因子是与正在合成的RNA连相结合，并利用水解ATP或其他核苷三磷酸释出的能量从5`→3`端移动，当聚合酶遇到终止信号时，聚合酶移动速度减慢，ρ因子就很快追赶上来，使转录终止，释放RNA，并使RNA聚合酶与ρ因子一起从DNA上脱落下来。 无论那种终止类型，终止信号都存在于新合成的RNA分子中，而非存在于模板DNA中。 ★蛋白依赖性的转录终止机制 ★非蛋白依赖性的转录终止机制 开始 1.RNA聚合酶延DNA链移动，识别转录起点（启动子） (启动子) 打开螺旋，形成聚合酶-DNA-RNA复合体。 17bp 螺旋解开长度 12bp DNA-RNA复合体长度 3.DNA螺旋前开、后合,RNA长长，不断脱离DNA。 (终止子) 4.识别终止信号（终止子），结束转录，各自分离。 （3）真核生物的转录作用 真核生物存在着三种不同的RNA聚合酶：RNA聚合酶I、RNA聚合酶