第9章 植物器官的培养 .pptVIP

制作者：吴翠云 植物器官的培养 第九章 植物器官的培养 器官培养 包括离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。以器官作为外植体进行离体培养，是植物组织培养中最主要的一个方面，进行的植物种类最多，应用的范围也最广。 第五章 植物器官的培养 器官培养的意义： 1. 器官培养是研究器官生长、营养代谢、生理生化、组织分化和形态建成的最好材料和方法； 2.器官培养在生产实践上具有重要的应用价值. 第五章 植物器官的培养 如利用茎、叶和花器培养建立的试管苗，可在短期内提高繁殖速率，进行名贵品种的快速繁殖； 利用茎尖培养可得到脱毒试管苗，解决品种的退化问题，提高产量和质量； 将植物器官作诱变处理，用器官培养可得到突变株，进行细胞突变育种。 第五章 植物器官的培养 第五章 植物器官的培养 第一节 营养器官的培养 第五章 植物器官的培养 第一节 营养器官的培养 一、离体根的培养 （一） 意义： ①生理代谢研究的优良实验体系 ②研究器官分化形态建成的良好体系 ③建立快速生长的根无性系 ④进行诱变育种 营养器官的培养——根的培养 （二） 培养方法 1. 培养基选择 White培养基；2/3或1/2 MS 和 B5培养基 注：离体根生长要求 　　　　 提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入B1、B6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养温度25－27℃，暗光培养。 营养器官的培养——根的培养 2. 无性繁殖系的建立 种子消毒 →→ 接种→→待根伸长后从根尖一端切取长1.2cm的根尖→→接种于培养基→→发育出侧根→→待侧根生长约1周后切取侧根的根尖进行扩大培养→→又迅速生长并长出侧根→→切下进行培养，如此反复→→得到从单个根尖衍生而来的离体根的无性系。 3. 培养条件 暗光和温度25-27℃。 根无性繁殖系的建立 营养器官的培养——根的培养 4. 植株再生培养 根段的离体培养也可以用来再生植株。 第一步诱导形成愈伤组织。 第二步在再分化培养基上诱导芽的分化、在愈伤组织上分化成小植株。 植物器官的培养 营养器官的培养——茎尖的培养 （一）茎尖培养概念及类型 茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行无菌培养。 茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： 微茎尖培养: 带有1-2个叶原基的生长锥, 其长度不超过0.5mm 普通茎尖培养：较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽 这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便，茎尖容易成活，成苗所需时间短 营养器官的培养——茎尖的培养 茎尖培养的意义： 普通茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗时间短，加快繁殖。 微茎尖培养可获得脱毒苗； 营养器官的培养——茎尖的培养 （二）茎尖培养方法及步骤 营养器官的培养——茎尖的培养 ①直接取材：在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。 ②从试管苗获取。 营养器官的培养——茎尖的培养 植物器官的培养——茎尖的培养 3、接种 接种前再剥掉一些叶片，使茎尖0.5cm →→接种 要求：随切随接，动作迅速。 亦可将切下茎尖材料在1－5% VC液中浸一下。 植物器官的培养——茎尖的培养 4、 培养的方法和程序 （1）培养基 ① 基本培养基 MS、White、 B5、 Heller培养基。 ② 蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。　　 ③ 激素（ 2，4-D，IAA， NAA ）和有机添加 物有明显影响。但激素浓度以0.1mg/L为宜， 不要太高。 植物器官的培养——茎尖的培养 生长太慢：茎尖不增大→→变绿→→细胞逐渐老化→→休眠 原因: 生长素浓度太低；温度过低或过高； 生长太快：茎尖迅速增大→→愈伤组织→→丧失成苗能力 原因: 生长素浓度过高；光照太弱或温度太高； 生长正常：茎尖基部稍增大