HER2insituhybridizationinbreastcancer要点解析.docVIP

HER2是人类表皮生长因子受体家族成员，由位于17号染色体长臂上基因（17q12-21.32）编码。报道显示，大约20%的乳腺癌HER2过表达和/或显示ERBB2基因扩增（这里提到的HER2，符合常规的做法），尽管我们的经验显示的如此，但是事实上，HER2的阳性率只有将近15%。HER2阳性是预后差的一个标志，与肿瘤的浸润和生存率低有关。 曲妥珠单抗是HER2的靶标单克隆抗体，其单独或与化疗协同对乳腺癌HER2过表达初级或转移的患者有效。因此，对于HER2+的早期或转移肿瘤，含有曲妥珠单抗的治疗已成为一种 通讯作者：W Hanna，医学博士，加拿大皇家医学院院士，解剖病理学家，多伦多新宁医院健康科学中心，湾景大道2075号，E4 32室。 E-mail：wedad.hanna@sunnybrook.ca 接收于2013年1月9日；2013年4月5日修订；2013年4月11日受稿；发表于2013年6月28 标准。由于临床上曲妥珠单抗对HER2阳性的肿瘤非常有利，HER2检测被推荐用于所有乳腺癌的诊断，以确定是否有使用曲妥珠单抗治疗的可能。 在临床上，目前有两种评价HER2状态的诊断技术被认可：免疫组织化学法（IHC）和原位杂交法(ISH)。IHC利用抗体评价HER2蛋白的表达情况，ISH通过标记了荧光素、显色物或银的DNA探针检测系统（即FISH, CISH或SISH）或者联合使用CISH和SISH系统（明视野双色ISH(BDISH)，或双抗原双色ISH(DDISH)）对HER2的拷贝数进行检测。ISH是使用单一的探针对每个细胞核中的HER2拷贝数进行计数，或使用双探针技术，进行17号染色体着丝粒探针（染色体计数探针17，CEP17）杂交，从而确定HER2:CEP17的比值。双探针的方法可进行双色杂交技术，使两个探针在一张切片上共杂交，或者使用两个探针依次对芯片进行银染分析。对于HER2扩增状态的评价，同时关注HER2:CEP17的比值比只关注HER2的平均拷贝数更有效，后者还依赖于肿瘤的有丝分裂指数、切片厚度、核截断的影响，以及非正常的染色体拷贝数（非整倍体性）。 美国FDA早前批准的HER2检测的说明书根据所使用的检测类型（表1）定义HER2阳性：IHC评分2+（弱阳性）或3+（阳性），每个细胞核HER2平均拷贝数4或HER2:CEP17≥2.0。现今，肿瘤IHC 2+/ISH -的患者不适合于曲妥珠单抗治疗。但是2007版的ASCO/CAP指南提高了HER2阳性的阈值，并提出了IHC和FISH结果中可疑结果的范围。指南指出，出现可疑结果时需进行附加检测，但是作者强调了曲妥珠单抗不应用于可疑检测结果患者的治疗，而根据原来FDA分界点，可疑检测结果应判定为阳性。ASCO/CAP推荐选择IHC或FISH之一作为初步检测，但是其他机构倾向于FISH作为主要检测手段，并且认为由于技术因素和评分的主观因素，IHC检测的准确性有限。 尽管ASCO/CAP的算法为HER2评价提供了一个清晰的指导，但是由于乳腺肿瘤的生物复杂性，检测结果的解释将变得困难，比如17号染色体的非整倍体性（包括多倍体性和单倍体性），CEP17和HER2信号的共定位，以及肿瘤间的遗传异质性。由于单倍体性和共定位情况极少，本文将重点放在了17号染色体的多倍体性和遗传异质性上。我们总结了有关这些问题的证据，并讨论了HER2检测解释和临床使用曲妥珠单抗资格的相关性（总结见图1和2）。 17号染色体多倍体性 特定的染色体区域拷贝数增加而导致的基因扩增，这种情况下通常会影响基因，使其过表达。超过90%HER2过表达的乳腺癌显示HER2的基因座也同时增加。相应的，多倍体性定义为一个或多个完整的染色体出现额外的拷贝。尽管17号染色体的多倍体性提供了一种增加HER2基 因数量的机制，并影响HER2的表达，其他临床病理学变量、预后和治疗应答并未得到确定。然而，无论评价依据是HER2的平均拷贝数还是HER2:CEP17比值，CEP17数量提高在乳腺癌报告中常出现，也是ISH情况不一致的主要原因，这些都是重要的问题。有人认为对17号染色体拷贝数的修正对精确判定HER2状态是必须的，但是其他人对这个观点存在质疑。对于是否或如何将CEP17数量提高（多倍体性）整合到HER2检测结果的解释中，目前尚未达成共识。 界定17号染色体多倍体性 缺乏细胞遗传学分析时，通过ISH观察到的CEP17信号数量通常作为17号染色体的拷贝数量（图3和4）。然而，适当的CEP17拷贝阈值用于界定CEP17状态（多倍体性）未被公认，了正常值2，也有可能是G2期细胞的存在和染因为即使二倍体样本人工切片检测时确实偏离色体不稳定造成的。