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- 2016-05-02 发布于湖北
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实验原理与方法
蔬菜生理与生态实验室
南京农业大学园艺学院
二零零九年十月
POD(过氧化物酶)活性的测定——愈创木酚法
3、CAT(过氧化氢酶)测定
4、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定
5、谷胧甘肽还原酶(GR)的活力测定:
6、O2-产生速率的测定(H2O2)含量的测定——碘化钾分光光度法
8、丙二醛(MDA)含量的测定
9、还原型抗坏血酸(ASA)和脱氢抗坏血酸(DHA)的测定
16、激素Indole-3-Acetic Acid(IAA)、Abscisic Acid(ABA)、GA3和ZA的测定
17、cDNA扩增片段长度多态性技术(cDNA-AFLP)TTC法)
一 氮蓝四唑(NBT)法测定超氧化物岐化酶(SOD)
【实验原理】
SOD是含金属辅基的酶。高等植物含有两种类型的SOD:Mn-SOD和Cu.Zn-SOD,它们都催化下列反应:
由于超氧自由基(O2.-)为不稳定自由基,寿命极短,测定SOD活性一般为间接方法。并利用各种呈色反应来测定SOD的活力。核黄素在有氧条件下能产生超氧自由基负离子O2.-,当加入NBT后,在光照条件下,与超氧自由基反应生成单甲月替 ( 黄 色 ) ,继而还原生成二甲月替 ,它是一种蓝色物质,在560nm波长下有最大吸收。当加入SOD时,可以使超氧自由基与H+结合生成H2O2和O2,从而抑制了NBT光还原的进行,使蓝色
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