药物分析课件第章B-生化药物和基因工程药物分析概念课件.pptVIP

连续测定法：在反应过程中对反应系统进行直接连续检测。 检测方法： 紫外-可见分光光度法 旋光法 荧光分光光度法 电化学测定法 酶偶联测定法 离子选择性电极测定法等。 每30s A的改变：0.015～0.018，呈线性关系的时间不得少于3min。 相当于的单位数为 每mg供试品中含胰蛋白酶单位数为 重组人白细胞介素 11的胰蛋白酶切肽图分析 肽图分析是评价重组产品蛋白质结构及其生产工艺稳定性的重要方法,目前常用的方法有ＣＮＢｒ裂解ＳＤＳ-ＰＡＧＥ微量肽图法和胰蛋白酶切ＲＰ ＨＰＬＣ肽图法。 1。酶切条件 取浓度为3ｍｇ·ｍＬ-1的样品0 4ｍＬ对1%ＮＨ4ＨＣＯ3充分透析,然后取透析样品250μＬ至微量进样瓶,加0 3ｍｇ·ｍＬ-1ＴＰＣＫ处理的胰蛋白酶10μＬ混匀,于37℃温控自动进样器酶切,每80ｍｉｎ进样一针,进样量6μＬ,用Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ32色谱软件选择214ｎｍ进行分析,直至ｒｈＩＬ 11完全酶解。按此方法摸索最佳酶切时间,在第14针后ｒｈＩＬ 11已被完全酶切,酶切时间在18～22ｈ范围内肽图图谱基本一致,即确定最佳酶切条件为37℃保温20ｈ。 2。ＨＰＬＣ系统测试 ＨＰＬＣ系统测试标准物质进样后呈3个峰,12次重复进样3个峰保留时间的ＲＳＤ分别为0. 4%,0 .