第七章蛋白质检验讲解.pptVIP

结构： MW11.5-14 万，分子含５个相同的亚基，亚基间靠非共价键连接成圆盘状多聚体。 理化性质：肝合成， pI 值为6.2，电泳位于 r 区带。 测定方法：半定量沉淀法（早），免疫化学法。 　　　　 （十一）C-反应蛋白质(CRP) 急性时相反应蛋白 功能：结合多糖，磷脂和核酸；激活补体，抗凝。 临床意义：第一个认定的急性时相反应蛋白,是急性时相反应的一个敏感指标，在ＡＭＩ、创伤、感染、外科手术时含量迅速升高，达到正常的2000倍。 参考值：＜ 8.0mg/L （血浆） 三、疾病时的血浆蛋白质 急性时相反应蛋白：在急性炎症或某些组织损伤时，有些血浆蛋白质含量会增高，有些会降低，这种现象称为急性时相反应。而这些血浆蛋白质被称为急性时相反应蛋白。 （一）炎症、创伤 前述除了甲胎蛋白、β2 －微球蛋白和 α2-巨球蛋白以外再加上纤维蛋白原的九种蛋白质 急性时相反应蛋白分类： 升高：其他６种蛋白质。 降低：前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白 急性时相反应机制： 当机体受到损伤或炎症时释放小分子蛋白质导致肝细胞 中上述蛋白质的合成增加或减少。 急性时相反应的应用： 急性时相反应时,血浆蛋白质的变化和创伤的时间进程有关，可用于鉴别急性、亚急性和慢性病理状态。 （二）肝脏疾病： （三）肾脏疾病： 肾病早期 严重肾脏 选择性蛋白质丢失 非选择性蛋白质丢失 （四）风湿病：免疫球蛋白，α1-酸性糖蛋白，结合珠蛋白及Ｃ３升高 （五）遗传性缺陷：多由于编码相应蛋白质的基因发生突变或缺失。 非典型的急性时相反应， 急性肝炎 慢性肝硬化 见表8-3 第二节 体液蛋白质测定 总蛋白测定 个别蛋白质的测定 蛋白分离测定技术 发展趋势: 测定体液标本: 血浆：普遍 尿液，脑脊液和胸腹水等：有选择性的组织病变检查 免疫化学法特异定量个别蛋白质 体液蛋白质的测定方法概括： 常规：免疫浊度法、免疫扩散法，免疫电泳法， 微量：放射免疫测定（RIA），酶免疫测定法（ELA/ELISA） 电泳测定： 定量化学测定TPr，Alb 电泳 组成图谱 半定量 定量 染料结合法，UV法，折光法等 一、血清总蛋白测定 假设： １、 纯多肽链，含氮量平均为16 % ２、各种蛋白质与化学试剂反应性一致，仅为相对定量 测定依据：蛋白质测定一般利用蛋白质以下的结构或性质 1、元素组成测定：含N稳定； 2、重复的肽链结构：具有多个肽键； 3、酪氨酸和色氨酸与Folin-酚试剂反应显色或UV 吸收； 4、与色素结合的能力：与染料以离子键或共价键连接； 5、沉淀后借浊度测定：光度计测定； 6、光折射测定：折射仪测定。 方法： 1.凯氏定氮法－参考方法　　　2.双缩脲法( 推荐) 3.酚试剂法　　　　　　　　　4.散射比浊法 5.染料结合法　　　　　　　　6. UV 法 ７.折光测定法 * * 第七章 蛋白质检验 ??????????????????????????????人类白蛋白分子 本章内容概要： 第二节 体液蛋白质测定 第一节 概述 1、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆蛋白质（前 白蛋白、白蛋白）的来源和生理功能；血清总蛋白和白蛋白的 测定方法和原理。 2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类；血清球蛋白和纤维蛋 白原的测定方法 3、了解其他蛋白质的来源和生理功能；尿液蛋白和脑脊液蛋白 的检测 。 本章教学要求： 第一节 概 述 机体蛋白质： 体液蛋白质的检测： 机体主要的 生物大分子 含量：人体固体成分的45% 种类：10万，3000~5000种/单细胞 功能：生长，代谢、血凝、运输、免疫、信息传递、维持血浆胶体渗透压等 疾病发生 体液蛋白质异常 要判断异常 首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功能及分类及特点 一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 组成： 种类：1000种 500种 200种 含量：μg mg g 来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂 功能： ①营养作用，修补组织蛋白; ②维持血浆胶体渗透压：白蛋白维持75%~80%的血浆渗透压； ③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质； ④作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体； ⑤体液免疫防御系统：作为免疫球蛋白与补体等免疫分子； ⑥催化作用：酶的本质； ⑦代谢调控作用；作为底物，酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶； ⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；：除Ⅳ因子外均可 分类： 依据来源、分离方法和生理功能 来源 肝生成：绝大多数血浆蛋白质 其他组织细胞生成：免疫球蛋白和蛋白类激素 分离方法 盐析法：白蛋白