用紫外分光光度法测定总生物碱含量解析.pptVIP

用紫外分光光度法测定总生物碱含量 综述：党院霞 李杏花汇报：杨春军 资料：白妙林 赵彩玉 摘要： 目的：归纳总结用紫外可见分光光度法测定中药中总生物碱含量。 方法：查阅近二十年有关用紫外可见分光光度法测定单个药材，中 药复方中总生物碱含量的文献及资料。 结果：含生物碱药材及配方较多，用紫外可见分光光度法及紫外可见与其它方法联用测定其含量取得了广泛的应用，并取得了良好的效果。 结论：用紫外可较准确测定药材及配方中生物碱含量，在以后的研 究中应将其更多的与其它方法联用测定药材及配方中生物碱及其它成分含量。 生物碱及其测定方法 生物碱是存在于自然界（主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性有机化合物，有似碱的性质，所以过去又称为赝碱。大多数有复杂的环状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。 紫外分光光度法是通过可见-紫外分光光度计,产生可见光,紫外线照射某些不同物质,不同浓度吸收光谱的不同,可获得不同吸收光谱的曲线,同时它们的吸收峰数值与浓度成正比关系,遵循朗伯-比尔定律,不仅能鉴别物质及测定物质的含量,而且能和其他方法配合,研究物质的组成。生物碱具环状结构，有一定的旋光性和吸收光谱。具有光学活性，所以大多数研究者用紫外可见分光度法测定中药及复方中生物碱含量。 1 2 一、紫外分光光度法在单味药生物碱含量测定中的方法 单波长法（表1） 显色比值法（表2） 导数法（表3） 层析-紫外联用（表4） 研究方法 研究人员 研究过程与结果 结论 单波长法 刘志才等[2] 用岛津UV-210紫外分光光度计对苦参中苦参总碱的含量进行了测定。结果表明,苦参总碱的光谱在200 nm处有最大吸收,并且吸收值与苦参总碱的含量在3.285～16.426Lg/ml的范围内有良好的线性关系,r=0.999 9;其平均回收率为103.2%,RSD=0.3%。 从分析方法的精密度,样品的稳定性,浓度与吸收值之间的线性关系及回收率来看,紫外分光光度法测定苦参中苦参总碱的含量是一个切实可行的分析方法。 单波长法 陆世惠等[1] 用Lambda 25 型紫外/可见分光光度计测定两面针中总生物碱的含量。结果表明，两面针提取液在 329 nm 处有最大吸收，在3～8 μg/ml有良好的线性范围 ，r＝0.999 1(n=6)，氯化两面针碱的平均回收率为 99.5%，RSD＝2.32%(n＝5)。精密度考察中RSD＝2.01%(n＝5)。重复性考察中RSD＝2.20%(n＝5)，表明重复性较好。稳定性试验中RSD＝2.14%(n＝8)，结果显示在 24 h 内基本稳定。 用紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量的方法较好。 表 1 研究方法 研究人员 研究过程与结果 结论 显色比值法 王宇等[4] 对半夏药材采用超声提取、依据酸性染料比色法的原理，在pH 5.40缓冲液中加入0.1溴麝香草酚蓝显色剂，在416 nm处利用紫外分光光度法测定药材中总生物碱 紫外可见分光光度法与其它方法联用可较准确测定总生物碱含量 显色比值法 张菊红等[3] 将对照品蒺藜皂苷FSA-1和蒺藜总皂苷分别溶于硫酸-甲醇(7∶3)溶液中，于60℃作用15分钟后,用分光光度法在319 nm处测定蒺藜总皂苷的含量,浓度与吸收值之间有良好的线性关系r=0.999 6,平均回收率为98.22%,RSD= 1.61%。通过测定6批蒺藜全草中总皂苷的含量，表明本法简单，重现性好，结果准确。 紫外可见分光光度法与其它方法联用可较准确测定总生物碱含量 表 2 研究方法 研究人员 研究过程与结果 结论 导数法 吕定刚[6] 使用UV--2000紫外-可见分光光度法测定制川乌、制草乌、制附子中总生物碱的含量。以239nm--241nm处的一阶导数紫外光谱值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。将制备好的样品按照上述方法测定一阶导数紫外光谱值，计算生物碱的含量。在阴性液干扰的考察中发现在乌头碱的最大吸收波长处阴性液有一定的吸收，如果直接用零阶吸收光谱测定制川乌、制草乌、制附子中总生物碱的含量，受阴性液的干扰会给测定的结果带来一定的误差，而在一阶导数光谱中，在239nm处阴性液的吸收基本为零。因此，可以用一阶导数光谱法来消除阴性液的吸收干扰。实验表明，可以选定波长239nm--241nm进行一阶导数光谱计算。浓度在1--5μm/ml线性范围内，线性拟合较好。r=0.9995，制川乌、制草乌、制附子三者的RSD均小于0.05，表明该测定方法准确可靠。 紫外可见分光光度法与其它方法联用测定的结果准确可靠 导数法 黄淑彰等[5] 报道了使用一阶导数紫外分光光度法测定厚朴酚及厚朴酚的含量。 结果表明本法可以消除其它组分的干扰,平均回收率在99%以上