同源性比较最常用的软件程序是BLAST,此程序能鉴别相似性大于30%-40%的同源基因 有相同的结构域的非同源基因,可以通过在已知基因中结构域的功能推测未知基因的功能 5.2.2 用实验分析阐明基因功能 通过基因失活进行功能分析 1)基因剔除(gene knock-out) 定义:通过同源重组,一段无关的DNA片段取代某一特定的基因,使其失去功能的技术 原理:在一段无关片段的两侧连接与替换基因两侧相同的顺序,将这一构件导入目的细胞,由于同源片段之间的重组,可以使无关片段取代靶基因整合到染色体中。为了便于筛选,用于取代的外源DNA中含有报告基因 * * 第一阶段 构建带有中断基因的干细胞 * * 第二阶段 将中断基因置于动物体内 2)转座子标签法(transposon tagging) 通过向基因中插入转座元件或转座子使基因失活 人工诱导转座 3)RNA干扰(RNA interference) 利用双链小RNA高效,特异地降解细胞内同源 mRNA,从而阻断靶基因表达,引起基因表达沉默 5.2.2 用实验分析阐明基因功能 基因过表达用于功能检测 通过增加基因的拷贝数和采用强启动子促使基因超表达,使受体表现出生长和发育的异常,来研究基因的功能 Activation tagging * * 5.2.2 用实验分析阐明基因功能 其他的基因功能研究方法 基因失
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