茶氨酸对549细胞凋亡的影响及上海市居民饮茶情况调查解析.docVIP

申请同济大学医学硕士学位论文 （同等学力） 二○一一年十一月 A dissertation submitted to Tongji University in conformity with the requirements for the degree of Master of Philosophy November, 2011 学位论文版权使用授权书 本人完全了解同济大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，同意如下各项内容：按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存学位论文的印刷本和电子版，并采用影印、缩印、扫描、数字化或其它手段保存论文；学校有权提供目录检索以及提供本学位论文全文或者部分的阅览服务；学校有权按有关规定向国家有关部门或者机构送交论文的复印件和电子版；在不以赢利为目的的前提下，学校可以适当复制论文的部分或全部内容用于学术活动。 学位论文作者签名： 年月日 经指导教师同意，本学位论文属于保密，在年解密后适用本授权书。 指导教师签名： 学位论文作者签名： 年月日 年月日 同济大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下，进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。 签名： 年月日 摘要 茶氨酸是茶叶中一种主要的氨基酸，约占茶叶干重的2%左右，具有神经保护、抗肿瘤、镇静等多种功能。研究表明，茶氨酸能促进化疗药物的抗肿瘤作用，降低化疗药物的副作用，抑制癌细胞的侵润。但是关于茶氨酸本身对肿瘤细胞增殖和凋亡等的影响报道很少。本论文以肺癌细胞A549为研究对象，观察不同浓度的茶氨酸对其增殖和凋亡的影响；同时调查上海市居民饮茶情况，旨在为茶氨酸的应用提供理论依据。 取对数生长期g/L）或茶氨酸+顺铂（DDP），采用MTT法测细胞增殖情况。同样取A549细胞，加入0、80、400、2000、10000 g/L不同浓度茶氨酸含有0 g/L，2000 mg/L茶氨酸的培养液24 h，48 h后，采用荧光定量检测细胞凋亡相关基因urvivin，CCND1基因的表达情况 MTT实验结果显示，A549细胞在茶氨酸的作用下下降，呈浓度依赖性g/L的茶氨酸茶氨酸与DDP合用，能促进DDP效果，呈茶氨酸浓度依赖性。AO/EB染色，在荧光显微镜下观察，可见对照组大量被染成绿色的正常细胞，胞核完整。随着茶氨酸浓度增加，部分细胞染色体固缩、碎裂、胞浆稀少等细胞凋亡特征，且数量逐渐增多。随着作用浓度增加，早期凋亡细胞晚期凋亡细胞数量也增多，后者表现为细胞核为EB染色呈桔红色，浓聚或偏向坏死细胞呈不均匀的橙红色荧光，轮廓不清、解体或接近解体流式细胞仪，对照组凋亡率为1%，加入不同浓度的茶氨酸后，细胞凋亡率有所增加000 mg/L浓度下细胞凋亡率最高。添加80、400、2000、10000g/L的茶氨酸能改变细胞周期中细胞的相对构成，使G2期细胞数量明显减少，S期细胞数量增多。可见，茶氨酸能将细胞阻滞于S期，阻止细胞进入G2期。结果表明urvivin的表达水平在加入茶氨酸24后就明显低于对照，48时的表达量继续下降 本论文还进行了上海市居民饮茶情况调查：随机选择在上海地区出生和长大的人群，采用回顾性问卷调查法对研究对象进行调查，分析上海市居民饮茶习惯及其对健康的影响。调查发现，在接受调查的人群中，不同程度喝茶的占45.62%，上海市民主要饮茶目的是为了健康与提神（P0.01），家庭收入小于或等于1000元的家庭饮茶率明显低于其他家庭收入家庭（P0.01），被调查者多数喝茶年限多集中在5至15年（P0.01），上海人比较偏爱乌龙茶（P0.01），其次是绿茶和花茶。从本次被调查最终的结果看出，长期饮茶可使患病风险可明显降低，另外，适当运动人群的患病率低于不运动人群（P0.01），饮茶加上良好的运动习惯并且不抽烟喝酒，患病率更低(P0.01).。在连续三个月以上喝茶者中，多数人情绪状况很好或非常好，选择情绪状况一般或差的人明显低于其他各组（P0.01），有喝茶习惯的人选择精力较差的明显低于不喝茶的人数（P0.01）。 实验表明，茶氨酸能提高DDP 对人非小细胞肺癌 A549 细胞增殖的抑制作用，茶氨酸本身能够抑制 A549 细胞增殖、促进其凋亡，且具有浓度依赖性，其机制可能与Bcl-2基因、Survivin基因、CCND1基因的表达下调有关。上海居民中，饮茶习惯与教育程度、家庭收入有关，饮茶人口文化水平偏高，家庭收入低喝茶率低，喝茶能预防高血压、糖尿病等疾病发生。 关键词：茶氨酸