草本胶囊CDVPRO体内外抗菌作用的研究.docVIP

草本膠囊CDV－PRO體內外抗菌作用的研究 劉啟 （香港啟正寵物獸醫中心） CDV-PRO草本膠囊系德國alfavet公司於2004年開發的純天然草本藥劑（herbal medicine）.其主要成份以HoneySuchle Blumen Extract，Forsythia Extract、Echinacea purp Extract、Mentha piperita Extract、Achillea millefolium Extract為主，以傳統中國醫學理論結合西歐藥物提純技術。具有抵抗炎症，退熱，改善呼吸道症狀，增強免疫機能的作用（anti-infection, reduce fever, improvement of respiratory symptoms Strengthening the immune system）。2008年本中心引進該藥物，使用至今，用於犬貓病毒性呼吸器疾病(canin＆feline viral respiratory diseases)的醫治，效果較為理想。為驗證cdv-pro膠囊對犬貓幾種呼吸器感染常見可分離之病原體的抑制效果，通過幾種呼吸器疾病常見致病細菌包括（Bordetella bronchiseptica,Pseudomonas aeruginosa、Klebsiella、Staphylococcus aureus、Streptococcus pyogenes）的分離鑒定以及對分離菌株進行體內外抗病原體作用的研究，為犬貓常見致病微生物引起的呼吸器疾病的治療和預防提供科學的理論依據。 1 材料與方法 1．1材料 1.1.1 致病微生物 從本醫療中心幾間分店就診之患寵呼吸器採取的樣本，經細菌形態觀察，生化試驗、以及小白鼠致死性試驗等鑑定上述微生物體為呼吸器致病性病原體。 1.1.2 試驗動物 健康atc種小白鼠，體重18－20g。由TGH醫療科技公司提供。 1.1.3 藥物 CDV－PRO膠囊，由VETSHINE醫療貿易行提供。藥劑規格為200mg/cap。將膠囊拆開後，溶解於5ml滅菌蒸餾水中。 1.2 方法 1.2.1 體外抑制微生物試驗 KB紙片擴散法：將含不同濃度CDV－PRO的滅菌紙片（直徑6mm）平置於已均勻涂布好Bordetella bronchiseptica,Pseudomonas aeruginosa、Klebsiella、Staphylococcus aureus、Streptococcus pyogenes的平板表面，同時以生理鹽水紙片為陰性對照，置37℃培養24h後取出，測量各紙片周圍抑菌圈直徑。 瓊脂二倍稀釋法：藥液按無菌法依次稀釋至2，4，8，16倍，即濃度分別為0.5，0.25，0.125，0.63，即濃度分別為0.02，0.01，0.005，0.0025g/ml.將已稀釋藥液與普通瓊脂培養基充分混勻，制成含藥物的平板培養基。用接種環取1：1000的Bordetella bronchiseptica,Pseudomonas aeruginosa、Klebsiella、Staphylococcus aureus、Streptococcus pyogenes等五種懸液，畫線接種於上述含藥平板培養基上，37℃培養24h，觀察細菌的生長情況，細菌不生長的最低濃度即為該藥物對該菌的最小抑菌濃度（MIC值）。 1.2.2 體內抗菌試驗 動物分組及用藥：健康atc種小白鼠250只，雌雄隨機，隨機分為5組，每組10只，CDV－PRO設高，低劑量組，劑量分別為15，5G、kg，陽性對照組為amp組，同時設正常對照組和感染對照組。經預試測得感染小白鼠死亡的最小致死量，並作為感染菌量。結果使小白鼠死亡率達到90%的Bordetella bronchiseptica,Pseudomonas aeruginosa、Klebsiella、Staphylococcus aureus、Streptococcus pyogenes濃度分別是3X 10^5，6X 10^7，3X 10^8，6X 10^7，6X 10^5，劑量是0.5ml/只。連續灌胃給藥7D，每天1 次，於給藥第4天皮下注射（sc inject）上述Bordetella bronchiseptica,Pseudomonas aeruginosa、Klebsiella、Staphylococcus aureus、Streptococcus pyogenes菌液（0.5ml/只）感染小白鼠，再連續給藥3D，統計每組小白鼠死亡數。 2 結果 2.1 體外抑菌作用 2.1.1KB紙片擴散法的試驗結果 結果見表1 表1.1 各紙片周圍的抑菌圈直徑（Bordetella bronchiseptica） 藥物 濃度/(g/ml)