STAT3短发夹RNA的构建及对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的实验的研究.pdfVIP

STAT3短发夹RNA的构建及其 T11 C 对人结肠癌H 6细胞增殖 和侵袭的实验研究 硕士研究生：崔春晖 指导老w)ffi．黄宗海教授 摘 要 研究背景 随着我国人民生活水平的不断提高，结肠癌发病率呈城市化、年轻化上升 趋势，平均发病年龄较国外低10岁，严重影响了国民的健康。因此寻求新的诊断 和治疗的有效方法同趋迫切。而结肠癌的发生发展是一多基因、多步骤、多阶 段的复杂过程。外科手术仍是目前治疗结直肠癌的核心手段，围绕手术开展的 化学治疗虽然能在一定程度上延长患者的生存时限，却无法回避针对性差、毒 副作用大等缺陷。随着生物技术在医学领域的快速发展和从细胞分子水平对发 病机制的深入认识，肿瘤生物治疗已进入了一个全新的时代。 癌变是细胞分化异常、增殖过度与凋亡受阻的结果，STAT3是转录信号传导 transducersandactivators 子与激活子家族(signal 员，STAT3信号传导通路与细胞的增殖、分化及凋亡密切相关，该通路持续激活 可导致细胞异常增贿和恶性转化，目前定义为癌基因。近年研究发现，STAT3是 多个致癌性酪氨酸激酶信号通道汇聚的焦点，包括生长因子、细胞因子及非受 体酪氨酸激酶等。但STAT3并不直接导敛肿瘤的发生，而是通过对其下游靶基因 摘要 关。越-束越多的证据表明STAT3在多种肿瘤组织与细胞系中异常激活，且与肿瘤 对治疗的反应密切相关。在多种肿瘤细胞和组织中都有过度激活，如自订列腺癌、 卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌等。 Sarcoma 研究发现STAT3在鸡肉瘤病毒(Rous Vh’US，v．Src)转染的胞内持续磷 中的STAT3激活，进而抑制肿瘤的生长；前列腺癌细胞株中STAT3被激活，反义 STAT3能够诱发痛细胞凋亡。但目前对与结直肠癌相关的STAT3系统性研究甚 D1平tlBcl2xl蛋白的表达。结果发现其表达水 p-STAT3(活化状态的STAT3)、cyclin T3 平明显高于证常肠黏膜。Kusaba等检测了108例人结直肠腺癌组织中P．STA 的表达，结果显示57．4％的组织高表达，其表达与肿瘤分化、淋巴结转移、Dukes分 期及术后的预后有关，提示P．STAT3蛋白的高表达与结直肠腺癌的进展及预后密 织，并通过诱导靶基因survivin、Bcl2xl的表达，促使肿瘤细胞增殖和淋巴结转移， 为结直肠癌的基础研究提供了具有判断预后价值的新的分子标志物。 Redell等提出阻断转录凶子可能足治疗肿瘤最为有效的方法之一。目日玎，阻断 STAT3信号通路治疗结直肠痛的方法主要是，针对STAT的显性负竞争性抑制、反 义寡核苷酸阻断、RNA干扰阻断等直接阻断，针对STAT上游的酪氨酸激酶采用特 异性抑制剂的间接阻断。研究结果都表明阻断STAT3信号转导通路治疗结直肠癌 的策略是可行的。因此寻找高效抑制STAT3表达的治疗方法，一直是研究的热点。 一般认为肿瘤细胞增殖活性是肿瘤侵袭、转移的基础和前提，但侵袭转移 的实现还取决于肿瘤细胞对正常组织的破坏能力、肿瘤细胞的运动能力以及对 侵袭转移中所遭遇环境的适应性等因素。基质金属蛋白酶(matrix 分，在结肠癌的浸润转移中起重要作用，尤其是有基质金属蛋白酶．9(matrix 硕士学位论文 metaUoproteinases．9，MMP．9)表达的结肠癌，其侵袭力更强，预后更差。 interferingRNA，siRNA)成功介导RNAi，为基因功能的研究提供了强大的武器， 也为结肠癌基因治疗增添了新的活力，发现RNAi的科学家安德鲁·法尔和