苹果叶片受斑点落叶病菌侵染过程中细胞Ca+定位及MdCPK的表达解析.pdfVIP

园艺学报，2015 ，42 (11) ：2113 –2122. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0362；http ：//www. ahs. ac. cn 2113 苹果叶片受斑点落叶病菌侵染过程中细胞 Ca2+ 定位及MdCPK 的表达 魏萌涵，倪维晨，竹龙鸣，蔡斌华，王三红* （南京农业大学园艺学院，南京 210095 ） 摘 要：以苹果感病品种‘红星’和抗病品种‘红玉’为材料，研究了苹果与斑点落叶病菌（Alternaria alternata apple pathotype ）互作过程中超微结构，细胞Ca2+分布，以及在钙信号转导途径中具有重要作用 的钙依赖蛋白激酶基因（CDPK）的表达，探讨钙信号在苹果防御斑点落叶病菌侵染中的作用。结果表明， 在未接种状态下，叶肉细胞结构完好，叶绿体呈卵圆形沿细胞边缘排列，Ca2+主要分布在细胞间隙和液泡 中，‘红玉’细胞间隙Ca2+密度比‘红星’大。接种斑点落叶病菌 8 h，‘红星’叶肉细胞中的Ca2+沉淀主 要分布在胞质中，而液泡等细胞器中减少；‘红玉’的Ca2+沉淀主要集中在胞质和筛管分子中，液泡和细 胞间隙中减少，且趋向于在细胞壁外围和液泡膜上沉积。接种 18 h，‘红星’叶肉细胞间隙Ca2+沉淀密度 增加，而‘红玉’中的 Ca2+沉淀主要集中在叶肉细胞的胞质和液泡，以及筛管分子中。接种 24 h ，‘红星’ 叶肉细胞结构已发生形变，质膜发生裂解，筛管壁木质化加厚，Ca2+沉淀主要分布在液泡中；‘红玉’叶 片细胞结构完好，Ca2+沉淀主要分布在液泡和胞质中。接种 36 h，‘红星’叶肉细胞受到菌丝入侵，结构 和形态遭到破坏，在未受损叶肉细胞中 Ca2+沉淀主要集中在液泡中，在受损的细胞中 Ca2+沉淀无序地散 布在受损细胞周围及细胞间隙；此时‘红玉’叶肉细胞中 Ca2+沉淀主要集中在胞质和液泡中，并且能够 保持 Ca2+动态平衡。在接种后不同阶段，‘红星’和‘红玉’叶片中MdCPKs 基因呈现不同的表达特点： 大多 MdCPKs 在‘红玉’中的表达量在 24 h 达到最高值；‘红星’中在36 h 达到表达峰值，且表达量也 比‘红玉’中低得多。上述结果表明，钙信号响应斑点落叶病菌侵染，在抗病苹果品种‘红玉’中，Ca2+ 内流是细胞质Ca2+上升的主要来源；在感病品种‘红星’中，细胞器 Ca2+释放是细胞质 Ca2+ 的主要来源。 ‘红玉’苹果MdCPKs 基因响应病菌侵染比‘红星’苹果早而且强烈。 关键词：苹果；斑点落叶病菌；钙离子定位；钙依赖蛋白激酶（CDPK ） 中图分类号：S 661.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）11-2113-10 2+ Ca Redistribution and Expression of MdCPK in Apple Leaves Infected by Alternaria alternata Apple Pathotype * WEI Meng-han ，NI Wei-chen ，ZHU Long-ming ，CAI Bin-hua，and WANG San-hong （College of Horticulture，Nanjing Agricultural University ，Nanjing 210095 ，China） Abstract ：To investigate the function of calcium signal of apple trees during defense process in response to Alternaria alternata apple pathotype （A. alternata AP ），this study analyzed the leaf cell 收稿日期：2015 –07 –16；修回日期：20