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基因工程简介
一 基因工程的基本内容
教学目的
基因工程的概念(A:知道)。
基因操作的工具和基本步骤(A:知道)。
重点和难点
教学重点
基因操作的工具和基本步骤。
教学难点
限制性内切酶和运载体的作用。
提取目的基因的方法和目的基因导入受体细胞的途径。
教学过程
【板书】
基因工程的概念
基因的剪刀——限制性内切酶
基因操作的工具 基因的针线——DNA连接酶
基因工程 基因的运输工具——运载体
的基本内容 提取目的基因
基因操作的 目的基因与运载体结合
基本步骤 将目的基因导入受体细胞
目的基因的表达与检测
【注解】
一、概念:基因拼接技术或DNA重组技术,是在生物体外对,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物有基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物。
二、操作工具
(一)基因的剪刀——限制性内切酶
主要存在于微生物体内,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。切开的带有几个伸出核苷酸的DNA单链切口,被称为黏性末端。
(二)基因的针线——DNA连接酶
黏性末端的氢键可以重新形成,但DNA“骨架”末端的连接要靠DNA连接酶
(三)运输工具——动载体
能够在宿主细胞内复制并稳定地保存;具有多个限制酶切位点,以便与外
1.具备条件 源基因连接
具有某些标记基因,便于进行筛选
2.举例:质粒、噬菌体和动、植物病毒等
3.质粒:最常用的运载体,存在于细菌和酵母菌,是很小的环状DNA。它的存在与否对宿主细胞的生存没有决定性作用,但质粒的复制只能在宿主细胞内完成。
三、操作步骤
直接分离基因:鸟枪法(操作简单、具有一定的盲目性)
(一)提取目的基因 反转录法
人工合成基因 人工合成法(由已知的氨基酸序列→mRNA序列→
基因的核苷酸序列→以单核苷酸为原料合成目的基因
(二)目的基因与运载体结合(用同种限制酶切割目的基因和质粒,让两者形成重组质粒)
(三)将目的基因导入受体细胞
1.常用的受体细胞有:大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等
2.若用细菌作受体细胞,为便于导入,常用氯化钙处理细菌细胞
(四)目的基因的表达和检测
【同类题库】
基因工程的概念(A:知道)
.科学家们经过多年努力,创立了新兴生物技术——基因工程,实施该工程的最终目的是(B)
A.定向提取生物体的DNA分子 B.定向地对DNA分子进行人工“剪切”
C.在生物体外对DNA分子进行改造 D.定向地改造生物的遗传性状
.工程菌是指(C)
A.用物理或化学方法诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系
B.用遗传工程的方法,把相同种类不同株系的菌类通过杂交得到的新细胞株系
C.用基因工程的方法,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系
D.从自然界中选取能迅速增殖的菌类
基因操作的工具和基本步骤(A:知道)
.下列关于基因工程的叙述正确的是(D)
A.DNA连接酶能使两个粘性末瑞之间的碱基结合
B.限制性内切酶的切口一定是GAATTC的碱基序列
C.质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的工具
D.对目的基因进行大量复制的过程可称为分子“克隆”
.有关基因工程的叙述,正确的是(B)
A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用
B.蛋白质的结构可以为合成目的基因提供资料
C.质粒都可以作为运载体
D.重组质粒的形成在细胞内完成
.基因工的操作步骤:①使目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④提取目的基因,正确的操作顺序是(C)
A.③②④① B.②④①③ C.④①②③ D.③④①②
.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是(C)
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快
D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
.有关基因工程的叙述正确的是(D)
A.限制性内切酶只在获得目的基因是才用 B.重组质粒的形成在
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