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本课程实验内容 实验一 药理实验基础知识 实验二? 不同给药途径对药物效应的影响 实验三 药物的协同作用和拮抗作用 实验四 动物机能状态对药物作用的影响 实验五 利多卡因和普鲁卡因的表面麻醉作用观察 实验六 药物敏感性实验 实验七 磺胺类药物内服给药后的血中药物浓度测定 实验八?????? 链霉素急性毒性反应及解救 实验九 有机磷酸酯类中毒及解救 实验四??动物机能状态对药物作用的影响 实验目的 了解机体在肝、肾功能正常或异常时,对某些药物的作用可能产生影响,从而认识临床用药时应该注? 意的有关问题。 实验要求 掌握小白鼠肝、肾损伤病理模型的制备; 掌握它们大体解剖的病理变化。认识动物机能状态对药物体内过程的影响,从而引起药物作用的变化,引申临床用药时的注意事项。 实验仪器、设备 仪器:注射器,针头,天平,鼠笼。 药物:四氯化碳、氯化高汞。浓度与注射剂量? 实验内容 给健康小白鼠注射四氯化碳,造成肝损伤,后用硫喷妥钠注射,与健康小白鼠对照, 比较它们麻醉出现及维持的时间的不同; 给健康小白鼠注射氯化高汞,造成肾损伤,后用链霉素注射, 与健康小白鼠对照,比较它们活动情况的差异; 解剖所有小白鼠,分别观察它们肝和肾的病理变化,并与健康小白鼠比较。 实验五??利多卡因和普鲁卡因的表面麻醉作用观察 实验目的 了解利多卡因和普鲁卡因的表面麻醉作用的差异,认识如何选择麻醉药。 实验要求 掌握滴眼给药的方法;在相同的时间点内,分别观察给予两药后,左、右眼表面麻醉的情况; 结合两药的药理特性对实验结果进行分析,并了解作为表面麻醉时临床选药的依据。 实验仪器、设备仪器: 固定箱,剪刀,滴管。 实验内容 取兔1只,放入兔固定箱内,剪去睫毛,用兔须触试角膜表面,观察并记录眨眼反射情况。 在兔的左眼滴入利多卡因溶液;在右眼滴入普鲁卡因溶液。均为1%。 在给药后2、5、10、20、30、40分钟分别观察比较两眼的眨眼反射的差异。 实验六 药物敏感性实验 学习内容 药物敏感实验——纸片法 定量药敏实验——试管二倍稀释法 学习要求 掌握两种药物敏感实验的原理、方法及注意事项。 抗菌药物敏感性试验(AST,简称药敏试验): 用于测试抗菌药物在体外对病原微生物有无抑制作用。常用最低抑菌浓度(MIC)表示,即体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度。通常根据MIC结合常用剂量时体内该药所能达到的血药浓度,划定细菌对各种抗生素敏感或耐药的界限,给出S(敏感)、I(中介)、R(耐药)等定性的结果,方便临床用药。 检测病原菌对各种抗生素的敏感性,指导临床合理用药。 用于流行病学调查及院内感染的监控,控制和预防耐药菌株的流行。 为经验用药提供参考依据。 方法:扩散法(纸片法)、稀释法(有琼脂稀释法和液体稀释法) 药敏纸片的人工制作 定性滤纸用打孔器打成直径6mm的圆片,每100片放入一小瓶中,160℃干热灭菌1---2小时,或用高压灭菌(6.8kg30min)后在60℃条件下烘干。(此应提前做好) 抗菌药物的浓度(指有效药物浓度)青霉素 200U/ml 其它抗菌药物 1000ug/ml磺胺类药物10mg/ml 中草药制剂 1g/ml庆大霉素4万单位/ml,稀释为1000单位/ml。 (临床上可按照药品使用说明书,如上面标明5克本品可拌50千克饲料,其换算方法为l克本品可拌10千克饲料,也就是1克本品拌l0000克饲料,相当于药品浓度为l克本品加l0000毫升蒸馏水。) 用无菌操作法将欲测的抗菌药物溶液1ml,加入100片纸片中,置冰箱内1—2小时,用下列方法烘干: 培养皿烘干法:将浸有抗菌药液的纸片摊平在培养皿中,于37℃的温箱内保持2--3小时即可干燥,或放在无菌室内过夜干燥。 将制好的各种药物纸片装入无菌小瓶中,置冰箱内保存备用。并用标准敏感菌株做敏感性实验,记录抑菌环的直径。 干燥的药敏纸片可保存6个月。 使用前用标准的敏感菌株做药物敏感实验,若抑菌环比原来小,则表明该纸片已失效。 纸片法 每组约7-8个平皿(每人1个),每个平皿约20毫升琼脂培养基,即约200ml。按照每组500毫升琼脂培养基、100毫升肉汤培养基准备。每平皿约4张纸片,每班约240张以上。 将琼脂培养基熔融后,每个平皿倒入约20毫升,晾干后,用玻棒蘸含菌棉球(玻棒、棉球均事先消毒)涂抹均匀后晾干。 用镊子夹纸片,每个平皿贴4张纸片,要使纸片全部紧贴培养基。为保证均匀,可于平皿背部划出贴纸片点。 36摄氏度培养过夜。测量宽度。 试管稀释法 每组2排试管,每排10支。共80支。 将庆大霉素用肉汤稀释液成64微克/毫升。每班20毫升即可。 挑选10支无菌试管编号1—10。 无菌加入1.0毫升肉汤至第2到10管内。 将64微克/毫升庆大霉
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