粘附分子和细胞间隙连接通讯在肺癌侵袭和转移中的作用及药物的调控研究.pdf

英文缩略语 PBS 0．0IM PH7．2-7．4磷酸盐缓冲液 PG 高转移性人肺巨细胞癌细胞系 D9 低转移性人肺癌细胞系 RPMI1640 细胞培养液 DMSO 二甲基亚砜 MTT 水溶性四唑蓝 Ec 内皮细胞 6J]C 细胞间隙连接通讯 CAM 细胞粘附分子 CD44 粘附分子单抗 CD54 粘附分子单抗 Cx43 细胞间隙连接蛋白 CD34 内皮细胞分子单抗 E-cadherin 上皮型钙粘附素 Selectins 选择素族 [GSF 免疫球蛋白超家族 Connexin 连接蛋白 LSCM 激光扫描共聚焦显微镜成像技术 5．6-CFDA 荧光染料5．6-羟基荧光素乙酸乙酰盐 FRAP 荧光光漂白后的恢复技术 FCM 流式细胞仪 TP 茶多酚 LPS 脂多糖 RSM 丹参 粘附分子和细胞间隙连接通讯在肺癌侵袭和转移中的 作用及药物的调控研究 一 摘 要 ／ 【临床工作中遇到的癌症患者在确诊时大多已有转移。这是癌症治疗过程中一 ＼ 个极为复杂和重要的问题，尽管原发肿瘤可经手术切除或进行放疗、化疗及免疫 治疗，但转移瘤往往对以上措施效果不佳。临床观察表明大多数患者死于转移。 原发性肺癌是一种常见的恶性肿瘤，发病率逐年上升，现已成为恶性肿瘤死亡率 最高的肿瘤之一。在肺癌治疗中外科手术十分重要，术后辅助化疗和放疗可以减 少局部复发的可能，但不提高生存率。单纯的外科治疗是I期、II期非小细胞肺 癌的最佳治疗选择，但50％临床I期病人仍死于复发，表明虽然手术是肺癌最好的 治疗方法，但术后转移复发是肿瘤死亡的主要原因，能否对肺癌术后患者的复发 转移进行成功防治，是治疗肺癌的关键之～，是当前研究的重要课题。 细胞粘附分子(cⅢ)是参与细胞一细胞以及细胞一基质之间作用的一类粘附物 质的总称，包括钙粘附素族、整合素族、免疫球蛋白超家族、选择素族、透明质 酸受体类(CD44)及其他GA^I。近年来的研究表明cAM在肿瘤侵袭和转移中发挥着重 要的作用，肿瘤细胞与血管内皮细胞间的相互粘附作用被认为是肿瘤血行转移的 关键步骤，抑制它们之间的相互作用对探讨肿瘤的转移机制及建立药物的调控作 用具有重要的意义。 intercellular junction 细胞间隙连接通讯(gap 细胞间的一种重要连接方式，在细胞分化，生长控制及维持体内环境平衡等方面 起重要作用。GJIC有同源性和异同源性，以往一些研究显示，GJIC与肿瘤的生长 和转移相关。在肿瘤的生长中，同源性和异同源性6JiC异常先于肿瘤形成，与维 持肿瘤的表型有关。一些实验表明，肿瘤细胞与血管内皮细胞问的通讯由间隙连 关系。 一、肺癌PG细胞生长、转移的相关机理及药物的调控研究 f 【1．实验方法 弋 探讨细胞内ca2+浓度、CD44表达、细胞间隙连接通讯及其蛋白在肺癌转移中 的作用。采用MTT法体外观察不同浓度茶多酚对PG细胞的杀伤作用；应用激光共 聚焦显微镜和流式细胞仪分析，检测用药后PG细胞内ca2+浓度、CD44表达、细胞 增殖周期分布以及细胞间隙连接通讯的变化。 2．实验结果 4个浓度的茶