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小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备.pdf
麦类作物学报 2009 ,29 (3) :380384
J ournal of Triticeae Crop s
小麦热激蛋白W H S P 90 基因的原核表达及多克隆抗体制备
1 ,2 2 2 1 2 2 2
李 琳 ,徐兆师 ,刘 丽 ,于 卓 ,李连城 ,陈 明 ,马有志
( 1. 内蒙古农业大学农学院 , 内蒙古呼和浩特 0 100 19 ; 2 . 国家农作物基因资源和基因改良重大科学工程 ,
农业部作物遗传育种重点开放实验室 , 中国农业科学院作物科学研究所 ,北京 10081)
摘 要 : 为了进一步研究 H SP90 基因的功能 ,将 W H S P90 基因构建到原核表达载体 p E T28a ( + ) 中 ,得到
( )
Hi sW H S P90 融合表达载体 ,并转化到大肠杆菌 BL 2 1 D E3 中 ,发现 1 mmol/ L IP T G 诱导 4 h 蛋白表达量最大 ;
( TM )
经过蛋白标记亲和层析柱 Hi s Trap H P 纯化得到的纯化蛋白浓度达到 0 . 4 mg/ mL 。免疫家兔制备抗体 ,用间接
EL ISA 法检测免疫后家兔抗血清效价大于 125 000 ,满足后续试验要求的效价值 ,为在蛋白水平上研究 W H S P90
基因功能提供了基础 。
关键词 : 小麦 ; H SP90 ;原核表达 ;蛋白纯化 ;多克隆抗体
( )
中图分类号 :S5 12 . 1 ; S336 文献标识码 : A 文章编号 :1009104 1 2009
Expression of Wheat Heat Shock Protein W HS P90
Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibodies
L I L in1 ,2 , XU Zhaoshi2 ,L IU L i2 ,Y U Zhuo1 ,L I L iancheng2 , CHEN Ming2 , MA Youzhi2
( 1. College of Agronomy ,Inner Mongolia Agricut ural U niver sit y , Huhhot 0 100 192 , China ;2 . National Key Facilit y for
Crop Gene Resources and Genetic Imp rovement (N FCRI) , Key L aboratory of Crop Genetics and Breeding of Mini st ry of Agricult ure ,
In stit ut e of Crop Science ,Chinese Academy of Agricult ure Sciences ( CAA S) , Beij ing 100081 , China)
Abstract : To inve stigat e t he f unction of t he W H S P 9 0 gene , t he W H S P 9 0 gene wa s in sert ed into t
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