小麦籽粒谷蛋白提取方法的优化与双向电泳分析.pdfVIP

麦类作物学报 　2008 ,28 (6) :97 1 - 976 J ournal of Triticeae Crop s 小麦籽粒谷蛋白提取方法的优化与双向电泳分析 高 　璇 , 高利艳 , 晏月明 (首都师范大学生命科学学院 ,北京 ,100037) 　　摘 　要 : 为了建立一套适用于小麦谷蛋白分析的双向电泳分析系统 ,得到更加清晰的双向电泳图谱 , 以 高产优质小麦品种小偃 6 号和济麦 20 为材料 ,根据麦谷蛋白亚基含量较少的特点 ,对麦谷蛋白的提取方法以 及提取过程中所用的试剂的种类 、用量和处理时间等进行比较分析和优化 ,运用蛋白定量法测定提取样品的 蛋白质含量 ,摸索出一套完整的用于双向电泳分析的麦谷蛋白提取和样品制备方法 。利用此蛋白提取以及双 向电泳方法可以获得分辨度较高的电泳分离图谱 ,特别是在低分子量谷蛋白区域 ,可分离出约 200 个蛋白点 , 可作为小麦籽粒蛋白质组研究的重要工具 。同时 ,通过对不同品种和不同种子发育时期的麦谷蛋白双向电泳 分离结果的分析 ,初步得到了麦谷蛋白在小麦籽粒生长发育过程中的合成积累情况 ,可为今后小麦发育蛋白 质组学以及对小麦品质改良的研究提供一定的科学依据 。 　　关键词 :小麦籽粒 ;麦谷蛋白;双向电泳 ;蛋白质组 + ( ) 　　中图分类号 :Q512 . 4 　　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 :1009104 1 2008 06097 106 Optimization of Extraction Method of Wheat Grain Gl utenins and Twodimensional Electrophoretic Analysis GAO Xuan , GAO L iyan , YAN Yueming ( College of Life Sciences , Capit al Nor mal U niver sit y , Beij ing 100048 , China) Abstract : To develop an efficient and high re solution 2D E p rocedure for w heat glut enin re search , in t he p re sent st udy , t he met ho d of glut enin subunit ext raction and samp le p rep aration for t wodimen sional gel elect rop hore si s (2D E) were op timized u sin g w heat cultivar s Xiaoyan 6 and J imai 20 and by changing t he t yp e and amount of ext raction reagent s a s well a s ext raction time . By u sin g t he op timized met ho d , sep aration re sult s of grain glut enin s f ro m diff erent develop ment al p erio ds in t he t wo w heat cultivar s showed t hat higher re solution of t he elect rop horetic sep aration p at t er n s could be ac